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低温
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现货
- 供应商:
鹿森生物
- 规格:
盒
特点
数分钟内可纯化得到即用型质粒DNA
分子生物学级纯质粒DNA,重复性好
针对高拷贝和低拷贝质粒载体提供不同的的实验方案
依据高产量补充实验方案操作,可以获得更高产量
产品详情
QIAprep Spin MiniPrep Kit用于纯化获得至多20 µg高纯度质粒或柯斯质粒DNA,得到的产物适用于常规分子生物级应用,如:荧光、放射性测序和克隆。依据高产量补充实验方案操作,可获得高达30 μg的高产量。
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文献和实验CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
来看一下。提交订单,等待引物到达:华大基因的速度非常快,大约在 2 - 3 个工作日即可拿到,在等待期间需要准备好:LB + 抗生素抗性平板;感受态细胞及相应培养基;无内毒素的 Cas9 载体质粒;BbsI 限制性内切酶;质粒小提试剂盒;常规限制性内切酶。
. 质粒拷贝数低: 由于使用低拷贝数载体引起的质粒 DNA 提取量低,可更换具有相同功能的高拷贝数载体。 11. 菌体中无质粒: 有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在,经多次转接后有可能造成质粒丢失。例如,柯斯质粒在大肠杆菌中长期保存不稳定,因此不要频繁转接,每次接种时应接种单菌落。另外,检查筛选用抗生素使用浓度是否正确。 12. 碱裂解不充分: 使用过多菌体培养液,会导致菌体裂解不充分,可减少菌体用量或增加(以天根生化的质粒小提试剂盒中的溶剂配置为例)溶液 P1、P2 和 P3 的用量
CRISPR/Cas9 基因敲除实验全记录 -- 构建 sgRNA+Cas9 载体
验证。但由于 293FT 细胞冻存于液氮罐中,今日打台风没有来得及复苏该细胞,因此转染实验有拖后。下一步质粒小提试剂盒酶切实验使用到的相关限制性内切酶(BbsI)准备好 293FT 细胞(应提前准备,一旦酶切验证成功,立即转染筛选),也就是在这一步,可以使用上文提到的读者建议用的酶切效率试剂盒。如此看来,可以节约下至少 4 - 6 天的时间,当真是好办法的。
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