北京现货多聚L-赖氨酸(分子量15万～30万)批发

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名称：北京现货多聚L-赖氨酸(分子量15万～30万)批发
英文名：Poly-L-lysine, Mw 150,000-300,000
CAS：25988-63-0
编号：SY0461
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
本品为多聚-L-赖氨酸（Poly-L-lysine），分子量为150,000-300,000，适用于细胞培养。另外，以氢溴酸（HBr）的形式提供，约1个赖氨酸残基结合1分子的氢溴酸，使其以稳定的结晶固体形式提供，并具有更强的水溶性。用作细胞培养基质，推荐使用量为：对于25cm2的培养板需要0.1mg/ml的聚赖氨酸溶液约0.5ml-1.0ml。

多聚赖氨酸（poly-lysine）是一种带正电荷的氨基酸聚合物，能够结合于DNA，红细胞膜或任何带负电荷蛋白，是一种非特异性的细胞粘附因子，促进细胞吸附到固相基质上。作用机理在于其可增强细胞膜表面的负电荷离子和固相基质表面（如细胞培养皿，载玻片等）的静电相互作用。当吸附到培养表面后，多聚赖氨酸提高用于细胞结合的阳离子结合位点数。多聚赖氨酸分子量的大小与粘度相关，即分子量较低，粘度较低；分子量较高，粘度较高，提供的粘附位点也较多。分子量＞30,000的聚赖氨酸适用于促进细胞粘附到固体基质。

多聚赖氨酸（poly-lysine）有两种常见亚型，D-和L-型。由于多聚赖氨酸是细胞结合的非特异性粘附因子，因此两种亚型都可用作包被固体基质，在细胞培养中都可促进细胞的贴壁生长。

中文别名：多聚赖氨酸溶液（L型）
英文别名：Poly-L-lysine Solution; PLL; Poly-L-lysine hydrobromide Solution
CAS：25988-63-0
分子式：L-Lys-(L-Lys)n-L-Lys·xHBr
分子量：150,000-300,000
外观：白色至类白色粉末
溶解性：溶于水（50mg/ml）
储存条件：-20℃干燥，有效期4年
结构式


注意事项
1）注意在细胞培养相关应用中，某些细胞会消化多聚 L-赖氨酸并吸收，摄入过多的多聚 L-赖氨酸会产生一定的细胞毒性。因此，遇到这种情况需选用多聚 D-赖氨酸（Poly-D-lysine），如多聚D-赖氨酸（5 mg/ml），分子量：150,000-300,000，细胞培养级，货号：SY0464。
2）将若想去除本品中的HBr，可将本品溶于中性缓冲液，可透析除去盐离子。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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·小牛肠碱性磷酸酶
编号：SY0388
英文名称：Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)
规格：1000U
本品为小牛肠来源的碱性磷酸酶，可以降解几乎所有磷酸单酯，但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。Alkaline Phosphatase，中文名碱性磷酸酶，可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除，常用于阻止载体的自连作用：在分子克隆实验中，DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在，载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团，因而不可以和自身3’ 端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止，提高了目的片段插入率。另外，碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板，以及用于该酶蛋白的脱磷酸作用等。

来源：携带小牛肠碱性磷酸酶表达质粒的酵母
质量控制（Quality Control）：无核酸外切酶、核酸内切酶、核糖核酸酶污染
热灭活（Thermal Inactivation）：在螯合剂存在下，65℃加热30min，99%活性不可逆丧失；使用苯酚，可使酶完全失活。
储存液条件（Storage conditions）：10 mM Tris-HCl (pH8.0), 1 mM MgCl2, 50mM KCl, 0.1 mM ZnCl2, 50% glycerol.
活性定义：在pH9.8, 37℃条件下，以对硝基苯酚磷酸盐(p-nitrophenylphosphate)为底物，1分钟生成1µmol硝基酚(p-nitrophenol)所用的碱性磷酸酶量定义为1个活力单位。
最佳pH（Optimal pH）：该酶在底物浓度高的情况下其最佳反应pH为10，在底物浓度低时，最佳pH为8，此时该酶活性较高浓度底物时稍低。
优化体系（Optimal Buffer）：AP Buffer (500 mM Tris-HCl, pH9.0; 10 mM MgCl2)
储存条件：-20℃

使用方法:
1 DNA去磷酸化
① 在1.5ml离心管中加入下列试剂：
无菌ddH2O————Up to 50µl
DNA 片段*————1-20pmol
Alkaline Phosphatase————1-2µl
10×AP buffer————5µl
【*】：单链DNA或含5’端突出末端的DNA推荐低温下孵育，平末端DNA或含3’突出末端的DNA建议在较高温度下孵育。
② 混匀上述试剂，于37℃或50℃孵育30min。或者37℃孵育15min后，再于50℃孵育15min。

2 酚氯*(代"仿")法抽提DNA
① 苯酚/氯*(代"仿")/异戊醇（25:24:1）抽提2次。
【注】：推荐在酚提取前将其在含5 mM EDTA, 0.5% SDS ,50 μg/ml Proteinase K的溶液中56℃孵育30min以彻底灭活碱性磷酸酶。在酚提取前于75℃孵育10min，灭活效果更佳。
② 氯*(代"仿")/异戊醇（24:1）抽提。

3 乙醇沉淀DNA
① 加入2.5µl 3M NaCl(终浓度150mM).
② 加入125µl（2.5倍体积）预冷乙醇，混匀后于-20℃放置30-60min，沉淀DNA。

4 溶解DNA
离心，彻底去除乙醇后，将DNA溶于适量去离子水（＜20µl）。


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