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- 汉恒生物高滴度逆转录病毒
- 2025年07月14日
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汉恒生物
汉恒高滴度逆转录病毒
髓系细胞：K562 U937 THP-1 L1210 HL-60 ………
淋系细胞： A3 Supb15 Reh Jurkat ………
NK系细胞：NK92
原代细胞：造血干(LSK) 原代T，B，NK，PBMC
你还为转染这些细胞而苦恼吗？
汉恒高滴度逆转录病毒轻松搞定！！
逆转录病毒感染关键知识点
1）细胞准备：由于试用装体积有限，请使用96孔板准备细胞，逆转录病毒感染细胞前，请确保目的细胞状态良好、无支原体污染。逆转录病毒感染的时候细胞汇合率为40%～60%间为宜。
2）感染细胞最佳MOI的测定：MOI（感染复数）是指每个细胞感染的病毒数。
逆转录病毒对于不同种类不同来源的细胞，其最适MOI各有差别，原则上最适MOI是感染效率较好的最低MOI。MOI一般以3，10，30，100的比例递增进行梯度摸索，一般的细胞基础逆转录病毒感染MOI可从3为开始，即设立4个常规的MOI摸索，即3，10，30，100。
3) 助转剂polybrene的选择：实验证明，polybrene可提高逆转录病毒对大部分细胞的感染效率，但polybrene有一定的细胞毒性，不同细胞对polybrene的敏感度不同，polybrene最常用的工作浓度为5～8μg/ml。
4）MOI对应病毒体积的换算（非常重要）
感染时细胞数（一般以传代计数细胞数×2计算）×MOI=病毒个数；则加入的病毒体积数=病毒个数/病毒滴度。
（1）逆转录病毒感染图片
（2）逆转录病毒感染荧光图片
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文献和实验好。 laoguaihb 欢迎加入病毒包装群：群号：182509118 沐沐秋 Hanbio专业提供腺病毒包装技术服务与相关产品： 1.多种标签的腺病毒、慢病毒及逆转录病毒载体； 2.400多种腺病毒产品现货，上百种慢病毒预装基因及pri-miRNA载体； 3. 腺病毒产品滴度10^11~10^12PFU,慢病毒产品10^8~10^9TU 产品详情请咨询汉恒客户服务索取技术资料！
控制(24、48小时的细胞及荧光状态判断)、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等都会影响到是否能包装成功)。 第二，如果有细胞培养和细胞转染 实验的常规经验，细胞因素应该没有什么问题(细胞培养人员一定要关注，包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立体感是否好、铺板均匀细胞密度适中否)，细胞产毒出毒期间过程中的活力是包装正常和出来的病毒滴度高低的一个重要环节(正常包装出病毒情况，慢病毒、逆转录病毒包装一个细胞出一个病毒颗粒，腺病毒是1000个，腺相关
到是否能包装成功)。 第二，如果有细胞培养和细胞转染实验的常规经验，细胞因素应该没有什么问题(细胞培养人员一定要关注，包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立体感是否好、铺板均匀细胞密度适中否)，细胞产毒出毒期间过程中的活力是包装正常和出来的病毒滴度高低的一个重要环节(正常包装出病毒情况，慢病毒、逆转录病毒包装一个细胞出一个病毒颗粒，腺病毒是1000 个，腺相关病毒是10000 个)，所以实践操作表明，病毒包装转染时细胞的密度要控制，使得收毒(72 小时)时细胞密度在90%-95
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