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基因组编辑/慢病毒包装/慢病毒构建
和元上海
和慢病毒|基因组编辑
慢病毒（Lentivirus）是一类改造自人免疫缺陷病毒（HIV）的病毒载体。是一种RNA病毒，可以利用逆转录酶将外源基因整合到基因组中实现稳定长时表达。
和元上海提供的慢病毒生产和指控采取了国际学术界公认的标准流程，采用三质粒系统在293T细胞中进行包装。所获得的慢病毒颗粒经过超速离心纯化，并通过qPCR对慢病毒基因拷贝进行滴定。一般情况下我们生产的慢病毒滴度在108~109TU/ml，完全可以满足各类实验的使用要求。
服务简介：
基因组编辑技术目前和元常用的是CRISPR/Cas9和TALEN，而CRISPR/Cas9被使用的更为广泛。通过设计sgRNA（short guide RNA)，以引导Cas9对DNA的定点切割，造成DNA双链的断裂，然后细胞可以利用非同源末端连接(Non-homologous End Joining，NHEJ）或者同源重组（Homologous Recombination, HR）方式实现基因敲除或对基因精确编辑的目的。
和元上海慢病毒具有感染范围广、持续表达等特点，主要用于难感染的细胞转染，如干细胞、免疫细胞（如DC细胞）和肿瘤细胞等。慢病毒的转染效率高和能持续表达的特点促进了基因组编辑的效果。
根据客户提供的基因信息，和元生物设计sgRNA序列，再将sgRNA片段构建到慢病毒载体，生产的病毒颗粒可以直接用于感染细胞或者动物实验。
服务流程：
服务优势：
对分裂期细胞和非分裂期细胞均有感染作用；
操作方便，安全性高；
表达稳定高效；
实验周期短；
多种载体可选。
可供选择的载体：
| 载体名称 | 载体特点 | 应用方向 |
|---|---|---|
| pLenti-CMV-puro-T2A-3FLAG-Cas9 | puro抗性，融合3FLAG | Cas9质粒现货 |
| pLenti-CMV-puro-T2A-3FLAG-Cas9n | puro抗性，融合3FLAG | Cas9n质粒现货 |
| pLenti-U6-sgRNA-CMV-EGFP | 带EGFP荧光 | sgRNA表达 |
病毒相关技术服务：
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免费索取技术资料姜女士
上海市浦东新区国际医学园区紫萍路908弄19号楼
试剂,细胞库 / 细胞培养,技术服务
生产厂商
2020.12.28-2021.01.31
2020.12.17-2021.02.10
2020.12.16-2021.01.31
