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酵母蛋白提取试剂盒

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      2-8℃

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      一年

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      大量

    • 供应商

      贝博生物

    • 规格

      50T/100 T

    规格:50T产品价格:¥800.0
    规格:100 T产品价格:¥1500.0

    贝博® BBproExtra® 酵母蛋白提取试剂盒适用于从各种酵母样本中高效而温和地抽提可溶性总蛋白。提取过程简单方便,避免了重复性差的研磨法,超声波法或压榨法对酵母细胞的破坏,避免激烈的机械处理造成的氧化和热度升高对目的蛋白的破坏作用。 本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解膜组份,包括细胞质膜、核膜和各种细胞器膜。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。

     

    1. 提取液制备:
    每500ul酵母蛋白提取液B中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
    2. 取酵母培养物,在4℃,1000×g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集酵母沉淀。
    3. 用冷PBS洗涤酵母两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
    4. 每100-200ul体积酵母沉淀物中加入250-500ul冷的酵母蛋白提取液A,充分混匀。
    5. 在室温或37℃条件下于振荡30分钟-2小时。
    6. 在4℃,2000×g条件下离心5-10分钟,弃上清,留沉淀。
    7. 在沉淀物中加入300-500ul冷的酵母蛋白提取液B,混匀后,在2-8℃条件下振荡30-45分钟。
    8. 在4℃,14000×g条件下离心15分钟。
    9. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到酵母总蛋白。
    10. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

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