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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
一年
- 库存:
大量
- 供应商:
贝博生物
- 规格:
50T/100 T
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100 T | 产品价格: | ¥1500.0 |
产品概述 product description
贝博® BBproExtra® 细胞质膜蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从细胞和动物组织提取细胞质膜蛋白。提取过程简单方便。提取的膜蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
使用方法
A. 细胞质膜蛋白提取
1. 试剂准备:
每500 μl冷的蛋白提取液A中加入5 μl试剂B和2 μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个以上细胞,在4℃,500×g条件下离心5分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 细胞样品中加入300-500 μl冷的试剂 A,高速涡旋充分混匀。
5. 置2-8℃振荡30分钟。
6. 高速涡旋振荡5秒,然后在4℃,12000×g条件下离心5分钟。
7. 将上清吸入另一干净离心管,37℃水浴5-10分钟。
8. 在37℃下 500×g -1000×g力离心3分钟。
9. 此时溶液分为两层,下层是膜蛋白约为30-50μl。
10. 小心移除上层,用50-150μl冷的试剂C溶解下层质膜蛋白部分,充分混匀,即得细胞质膜蛋白。
11. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
B. 组织样本质膜蛋白提取
1. 取适量组织样本用手术剪刀尽可能剪碎,加入冷的蛋白提取液A,用组织匀浆机/匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体,将匀浆吸入另一预冷的干净离心管。
2. 按照细胞蛋白的提取方法的第5步骤往下操作即可。
1. 试剂准备:
每500 μl冷的蛋白提取液A中加入5 μl试剂B和2 μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个以上细胞,在4℃,500×g条件下离心5分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 细胞样品中加入300-500 μl冷的试剂 A,高速涡旋充分混匀。
5. 置2-8℃振荡30分钟。
6. 高速涡旋振荡5秒,然后在4℃,12000×g条件下离心5分钟。
7. 将上清吸入另一干净离心管,37℃水浴5-10分钟。
8. 在37℃下 500×g -1000×g力离心3分钟。
9. 此时溶液分为两层,下层是膜蛋白约为30-50μl。
10. 小心移除上层,用50-150μl冷的试剂C溶解下层质膜蛋白部分,充分混匀,即得细胞质膜蛋白。
11. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
B. 组织样本质膜蛋白提取
1. 取适量组织样本用手术剪刀尽可能剪碎,加入冷的蛋白提取液A,用组织匀浆机/匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体,将匀浆吸入另一预冷的干净离心管。
2. 按照细胞蛋白的提取方法的第5步骤往下操作即可。
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文献和实验该产品被引用文献
参考文献
1.RuhanJiang et al.
A study on the degradation efficiency of fluoranthene and the transmembrane protein mechanism of Rhodococcus sp. BAP-1 based on iTRAQ
Science of The Total Environment 2020 (IF=6.551)
2.Cuilian Yu et al.
Taishan Pinus massoniana pollen polysaccharide inhibits subgroup J avian leucosis virus infection by directly blocking virus infection and improving immunity
Sci Rep. 2017 (IF=5.228)
3.Xiaoyun Lin et al.
Chimerically fused antigen rich of overlapped epitopes from latent membrane protein 2 (LMP2) of Epstein–Barr virus as a potential vaccine and diagnostic agent
Cellular & Molecular Immunology 2016 (IF=8.213)
4.Ge Zhao et al.
Phage Display against Corneal Epithelial Cells Produced Bioactive Peptides That Inhibit A spergillus Adhesion to the Corneas
PLoS ONE March 2012 | Volume 7 | Issue 3, (IF=4.411)
5.Lihong Liao et al.
The Influence of Down-Regulation of Suppressor of Cellular Signaling Proteins by RNAi on Glucose Transport of Intrauterine Growth Retardation Rats
Pediatric Research 2011 Volume 69, Issue 6, pp 497-503 (IF=2.882)
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Sci Rep. 2017 (IF=5.228)
3.Xiaoyun Lin et al.
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5.Lihong Liao et al.
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Pediatric Research 2011 Volume 69, Issue 6, pp 497-503 (IF=2.882)
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细胞质膜蛋白提取试剂盒
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