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- 2025年07月13日
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贝博生物
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1L
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文献和实验SDS-PAGE Western Blotting Protocols
). Part II – SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis 1. For each SDS-PAGE gel, sandwich one small and one large glass plate,separated by spacers (smeared with silicone lubricant) and an alignment card. Optional: The inside surface of the small
1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响? 在SDS-PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低;而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压剃度，压着蛋白质分子聚集到一起
一、材料与仪器30%丙烯酰胺溶液；1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液，PH8.8；1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液，PH6.8；电泳缓冲液，PH8.3；10%SDS溶液；10%过硫酸铵溶液；样品处理液；染色液；脱色液；电泳玻璃板，电泳电源架，电泳槽，电泳仪等；蛋白Mark。二、方法与步骤1) 分离胶和浓缩胶配制按下表比例分别配制分离胶和浓缩胶：2)凝胶板的准备a) 洗板：将洗洁精用温水稀释后，用它浸透海绵擦洗二块玻璃板，然后用自来水洗净，再用酒精将板擦干。b)配板
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