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文献和实验在NK-92细胞培养中,血清的选择和处理方式会影响培养基的配制。查看配方时,你可能会发现一个细节:马血清标注需要热灭活,而胎牛血清通常按配方要求直接加入。同样是血清,为什么操作不同?关键在于两者的来源、补体活性,以及配方对细胞培养条件的要求。下面将依次说明这一区别、马血清热灭活的原因、胎牛血清的处理方式,以及容易混淆的操作要点。实际配制时,应同时核对细胞株培养说明、培养基配方和所用血清的产品说明。
无血清培养的首选是AIM V培养基(SFM)。在开始进行新的细胞培养时,可以参考下表所列的条件: 细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基 293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10% 热灭活马血清 3T6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清 A549 上皮细胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛血清 A9 成纤维细胞 小鼠 结缔组织 DMEM, 10%胎牛血清 AtT-20 上皮细胞 小鼠 垂体
大鼠的血,不知道要不要灭活?答:你直接把采来的血液在离心管里4℃过夜,离心,取上清,在无菌过滤,也可灭活,然后分装冻存,用时再配。3、问:如果灭活会不会对血清中的一些因子有损伤?答:加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。灭活一般不会对血清中的一些因子损伤的。六、心肌细胞原代培养时血清的使用问题。1、问:在进行心肌细胞原代培养时,需要用含
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