甘露糖结合蛋白(MBL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

甘露糖结合蛋白(MBL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ELISA Kit for Mannose Binding Lectin (MBL)

MBL2; COLEC1; HSMBPC; MBP1; MBP; Collectin-1; Mannose-binding protein C; Mannan Binding Protein; Mannose-Binding Lectin(Protein C)2,Soluble(Opsonic Defect)

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• 编号SEB480Mu
• 物种Mus musculus (Mouse，小鼠) 相同的名称，不同的物种。
• 实验方法双抗夹心
• 反应时长3h
• 检测范围0.156-10ng/mL
• 灵敏度最小可检测剂量小于等于0.072ng/mL.
• 样本类型Serum, plasma, tissue homogenates, cell lysates, cell culture supernates and other biological fluids
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• 规格48T96T 96T*5 96T*10 96T*100
• 价格¥ 2873

产品包装图模拟

 

特异性

本试剂盒用于检测甘露糖结合蛋白(MBL)，经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测，因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

回收率

分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的甘露糖结合蛋白(MBL)（加标样品），重复测定并计算其均值，回收率为测定值与理论值的比率。

样本	回收率范围(%)	平均回收率(%)
serum(n=5)	97-105	101
EDTA plasma(n=5)	85-95	91
heparin plasma(n=5)	87-99	92

精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100 
批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差： CV<10% 
批间差： CV<12% 

线性

在定值血清及血浆样本内加入适量的甘露糖结合蛋白(MBL)，并倍比稀释成1:2，1:4，1:8，1:16的待测样本，线性范围即为稀释后样本中甘露糖结合蛋白(MBL)含量的测定值与理论值的比率。

样本	1:2	1:4	1:8	1:16
serum(n=5)	78-89%	83-103%	86-98%	84-94%
EDTA plasma(n=5)	87-101%	85-99%	79-90%	81-104%
heparin plasma(n=5)	87-105%	86-93%	79-89%	89-97%

稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

实验流程

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。

实验原理

将甘露糖结合蛋白(MBL)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的甘露糖结合蛋白(MBL)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的甘露糖结合蛋白(MBL)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甘露糖结合蛋白(MBL)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值)，计算样品浓度。

参考文献

杂志	参考文献
American Journal of Nephrology	Analysis of the Urine Proteome of Human Contrast-Induced Kidney Injury Using Two-Dimensional Fluorescence Differential Gel Electrophoresis/Matrix-Assisted Laser Desorption Time-of-Flight Mass Spectrometry/Liquid Chromatography Mass Spectrometry. [Karger: 000255439]
Current Eye Research	Serum Levels and H/L Gene Polymorphism of Mannose-Binding Lectin in Primary Open Angle Glaucoma [Ingenta: art00007]
Journal of Clinical Immunology	Complement activation contributes to the injury and outcome of kidney in human anti-glomerular basement membrane disease. [PubMed: 22941511]
Clinical and Experimental Immunology	Urinary mannose-binding lectin is a biomarker for predicting the progression of immunoglobulin (Ig)A nephropathy [PubMed: PMC3406374]
Clin J Am Soc Nephrol.	Alternative Complement Pathway Activation Products in Urine and Kidneys of Patients with ANCA-Associated GN [Pubmed: 24115193]
ACTA TROPICA	Novel findings on the role of ficolins and colectins in the innate response against Leishmania braziliensis [Pubmed: 32827456]
PLoS One	Complement activation profile of patients with primary focal segmental glomerulosclerosis [Pubmed: 32569286]
LIFE SCIENCES	The lectin pathway of complement and the initial recognition of Leishmania infantum promastigotes [34242658]