RBL-2H3细胞

细胞名称：RBL-2H3 大鼠嗜碱性细胞白血病细胞
组织来源：外周血；化学诱变嗜碱性细胞；白血病
培养条件：MEM +15% FBS(灭活)
形 态：贴壁；成纤维细胞
背 景：RBL-2H3是1978年国立牙科研究所的免疫学实验室从Wistar大鼠保持肿瘤状态的嗜碱性细胞中分离和克隆出来的嗜碱性白血病细胞株。 这些细胞具有高亲和力的IgE受体。通过集聚这些受体或与钙离子载体协同作用可以激活它们分泌组胺及其他递质。这株细胞广泛地用于研究肥大细胞FcERI和分泌的生化途径。 RBL-2H3细胞是研究FcERI结构的模型。它们广泛地用于研究细胞分泌的不同方面，包括细胞内钙浓度改变、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。虽然几乎所有批号的FBS都支持细胞的生长，但在某些批号中FcERI集聚后脱粒化得更好。另一株大鼠嗜碱性细胞株(RBL，ATCC CRL-1378)不会脱粒化。
RBL-2H3细胞提供原代/传代细胞，质量保证，生长状态良好，没有细菌 真菌 支原体等微生物污染。细胞一般以T25培养瓶包装，容积75ml细胞数量可达10的6次方左右。购买方收到细胞应当马上检查，如发现细胞状态不佳或者大部分死亡情况下，须当天联系我司。得到我技术确认后免费补发一株。一周内发现细胞有污染情况，请拍照记录并与销售部联系。

RBL-2H3细胞的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。我认为有以下几点需要注意：
（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；
（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。
（3）RBL-2H3细胞消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。
（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。
（5）关于“慢冻”，传统的方法，RBL-2H3细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。