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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 供应商:
泽叶生物
- 检测范围:
0.313-20ng/mL
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
酶联免疫实验
- 适应物种:
Homo sapiens human
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
血清、血浆及相关液体
- 规格:
48T/96T盒
上海泽叶生物试验以h.GDF-15为例,总结以下美国ImmunoClone检测试剂盒的技术质控的数据,
1.OD值:
正常保存条件下有效期内和超过有效期2个月所测OD值比较
正常有效期内OD值: 3.251,2.845,2.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08
超过2个月有效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07
2.回收率:分别于定值血清及血浆中加入一定量的h.GDF-15标准品,重复测定并计算其品均值,回收率为测定值与理论值的比率。
3.线性:分别于定值血清及血浆中加入一定量的h.GDF-15标准品,并将标本按1:2,1:4,1:8稀释,线性范围即为稀释后样本中h.GDF-15含量的测定值与理论值的比率。
批内差:取同一批次试剂盒对低值,中值和高值样本进行定量检测,每份样本测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值和SD值。
批间差:选取 3 个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定, 每个样本使用同一试剂盒重复测定 8 次,分别计算不同浓度样本的平均值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)
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文献和实验105重悬的细胞,300 g离心5 min,弃上清。加入500 μL稀释成1 ×的Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。 细胞悬液中加入5 μL的荧光素标记-Annexin V和5 μL的细胞核染色液。 轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育15~20 min。 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测,请于冰上避光静置并于1 h内完成检测。 检测 1)流式细胞仪检测 处理好的样本在流式细胞仪上检测。 2)荧光显微镜分析 取一滴用荧光素-Annexin V/细胞核染色液双染的细胞
示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
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