- ¥1580 - 8890
- 美国ATCC
- 美国
- ZY-k002
- 2025年07月15日
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- 库存：
大量
- 供应商：
泽叶生物
- 肿瘤类型：
见说明书
- 细胞类型：
细胞系
- 品系：
见说明书
- 相关疾病：
见说明书
- 物种来源：
鼠
- 免疫类型：
见说明书
- 细胞形态：
贴壁；上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 器官来源：
鼠
- 运输方式：
干冰运输及发送复苏存活细胞
- 年限：
2年
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
株
含量：>1x106 个/mL
污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
含量：>1x106 个/mL
污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存：滑膜细胞可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
如何去除原代培养中的成纤维细胞
培养细胞的纯化：1、自然纯化：即利用某一种类细胞的增殖优势，而排挤其他细胞生长，靠自然的增值潜力最后留下生长优势细胞，去除其他细胞。有些恶性肿瘤细胞可以通过此方法，自然纯化建立细胞系。
2、人工纯化（1）酶消化法：在消化培养细胞时，常是成纤维细胞先脱壁，而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁，特别是在原代培养和培养早期这种差别尤为明显，因而可以利用这种差异采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开。
（2）机械划除法：滑膜细胞原代培养成功后，上皮细胞和成纤维细胞所数都同时出现，混杂生长。这种混杂生长常常分区成片，每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。因此可以采用机械的方法去除不需要的细胞。
（3）反复贴壁法：成纤维细胞与上皮细胞相比，其贴壁过程快，大部分细胞常能在短时间内大约10－30min完成附着过程，而上皮细胞大部分在短时间内不能附着或附着不稳定，稍加振荡即浮起，这样可以利用此差别来纯化细胞。
（4）克隆法：采用细胞克隆法将细胞分成单个细胞，使之分别生长成克隆，选择出所需要的克隆。
（5）滑膜细胞培养及限定方法：某些细胞在生长过程中必须存在或必须去除某种物质，否则无法生长，可以利用这种技术来纯化细胞。
（6）流式分选。
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文献和实验我养过人类原代滑膜细胞，探讨传代经验：其实最好还是在细胞长满时、还没有接触性抑制之前传代为好1、预温0.25% trypsin， 0.02%EDTA2、用Ca－free的PBS洗涤贴壁细胞三次3、用1份0.25% trypsin， 0.02%EDTA和3份PBS室温下消化（不要用全量消化液因为对于细胞的悬浮作用不但未见有增强作用而且对细胞本身没有好处）4、在倒置显微镜下观察细胞悬浮情况，约有半数以上细胞开始漂浮就用移液管（滴管）移出，置入离心管中5、离心1000rpm，10min6、上清液移回
实验材料： 1. 实验动物：大鼠、兔，人手术切除的关节等； 2. 清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100µg/ml链霉素，pH7.2； 3. 培养液：RPMI1640培养基，补加15%小牛血清； 实验方法： 1. 将大鼠处死后，用75%酒精消毒； 2. 用手术剪剖开其四肢皮肤与肌肉，暴露长骨两端的关节，取出关节面滑膜组织置于盛有缓冲液的培养皿中； 3. 剔除滑膜组织外层结构及周边软骨组织，用缓冲液洗2—3次；
1500-2000转离心6分钟，最后一次用记数板观察细胞并计数。细胞最终悬浮于α-MEM含有10%胎牛血清中，接种到培养瓶中培养。8、必要时可做第三管细胞收集；并立即作原代滑膜细胞培养。9、每2-3天换液一次。体会：1、虽然国内外文献有组织块培养法获得滑膜细胞，但我试过，没有获得滑膜细胞，可能方法没掌握好或实验条件不同；2、我探索过用0.25% trypsin或0.25% trypsin＋ 0.02%EDTA 或 collagenaseⅠ或collagenaseⅡ消化细胞或合用，只有单用
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