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大量
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泽叶生物
- 肿瘤类型:
见说明书
- 细胞类型:
细胞系
- 品系:
见说明书
- 相关疾病:
见说明书
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
贴壁;上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 器官来源:
人
- 运输方式:
干冰运输及发送复苏存活细胞
- 年限:
2年
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
株
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:肺泡II型上皮细胞可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
如何去除原代培养中的成纤维细胞
培养细胞的纯化:1、自然纯化:即利用某一种类细胞的增殖优势,而排挤其他细胞生长,靠自然的增值潜力最后留下生长优势细胞,去除其他细胞。有些恶性肿瘤细胞可以通过此方法,自然纯化建立细胞系。
2、人工纯化(1)酶消化法:在消化培养细胞时,常是成纤维细胞先脱壁,而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,特别是在原代培养和培养早期这种差别尤为明显,因而可以利用这种差异采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开。
(2)机械划除法:肺泡II型上皮细胞原代培养成功后,上皮细胞和成纤维细胞所数都同时出现,混杂生长。这种混杂生长常常分区成片,每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。因此可以采用机械的方法去除不需要的细胞。
(3)反复贴壁法:成纤维细胞与上皮细胞相比,其贴壁过程快,大部分细胞常能在短时间内大约10-30min完成附着过程,而上皮细胞大部分在短时间内不能附着或附着不稳定,稍加振荡即浮起,这样可以利用此差别来纯化细胞。
(4)克隆法:采用细胞克隆法将细胞分成单个细胞,使之分别生长成克隆,选择出所需要的克隆。
(5)肺泡II型上皮细胞培养及限定方法:某些细胞在生长过程中必须存在或必须去除某种物质,否则无法生长,可以利用这种技术来纯化细胞。
(6)流式分选。
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文献和实验主要存在于线粒体中的一类内含子,它的剪接位点类似于核编码结构基因的内含子,并同样遵从GT--AG规律。剪接机理同核内含子的剪接相似,也要形成一个套索的中间体,通过形成5'-2'磷酸二酯键将要剪接的位点靠近到一起。但是,II型内含子的剪接又不完全与核内含子的剪接相同,它具有自我剪接的功能,不需要剪接体和snRNA的参与,也不需要ATP供能。从结构上看,II型内含子的6个结构域可形成发夹环, 结构域5与6之间只间隔3个碱基,结构域6参与转酯作用。
效果更好。3、分离纯化细胞:上皮细胞的分离纯化技术经过二三十年的发展日渐成熟,呈现多样化的特点。目前对细胞的分离纯化主要有以下几种方法:(1)密度梯度离心:密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同,在密度梯度离心中细胞所处的位置也相应不同。这是最早用于分离Ⅱ型上皮细胞的方法,至今仍在使用。用ficoll或percoll不连续梯度离心,猪肺泡Ⅱ型细胞最终纯度可以达到70%-85%左右[11-12]。沉降系数与细胞的直径和天然密度有关。由于Ⅱ型细胞与其他细胞存在密度和大小的交叉(如巨噬
成熟,呈现多样化的特点。目前对细胞的分离纯化主要有以下几种方法。1、密度梯度离心:密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同,在密度梯度离心中细胞所处的位置也相应不同。这是最早用于分离Ⅱ型上皮细胞的方法,至今仍在使用。用ficoll或percoll不连续梯度离心,猪肺泡Ⅱ型细胞最终纯度可以达到70%~85%左右[11-12]。沉降系数与细胞的直径和天然密度有关。由于Ⅱ型细胞与其他细胞存在密度和大小的交叉(如巨噬细胞),仅仅通过离心并不能有效去除杂细胞。Kikkawa(1974)让巨噬
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