小鼠肺泡II型上皮细胞产品图

小鼠肺泡II型上皮细胞

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  • TOPBIOTECH
  • TOPCP0017
  • 深圳
  • 2026年09月26日
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    • 细胞类型:

      原代

    • 供应商:

      拓普生物

    • 库存:

      1×106/Vial

    • 英文名:

      Mouse-AECⅡ

    • 生长状态:

      贴壁

    • 运输方式:

      干冰运输或T-25 flasks

    • 是否是肿瘤细胞:

      否

    • 细胞形态:

      成纤维细胞样

    • 物种来源:

      小鼠

    • 组织来源:

      肺

    小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞使用说明书
    Cat No:TOPCP0017
    产品简介
    TopBiotech提供的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞取自新鲜肝组织,按照标准操作流程分离培养。自主研发的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基(货号:TOPMP0017)能提供细胞最佳的生长条件,降低杂细胞污染,同时保证不同批次间细胞质量的稳定。此外,TopBiotech还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测来保证细胞纯度;同时也需要经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其它类型的细菌和病毒。

    细胞简介: 小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞分离自肺组织;肺泡由单层上皮细胞构成的半球状囊泡。肺中的支气管经多次反复分枝成无数细支气管,它们的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即为肺泡。小肺泡细胞,又称I型肺泡细胞,厚约0.1微米,基底部是基底膜,无增殖能力。大肺泡细胞,又称Ⅱ型肺泡细胞,分泌表面活性物质(二棕榈酰卵磷脂),以降低肺泡表面张力。Ⅱ型肺泡细胞位于Ⅰ型肺泡细胞之间,数量较Ⅰ型肺泡细胞多,但覆盖面积比Ⅰ型肺泡细胞小。细胞立方形或圆形,顶端突入肺泡腔。细胞核圆形,胞质着色浅、呈泡沫状。电镜下,细胞游离而有少量微绒毛,胞质内富含线粒体和溶酶体,有较发达的粗面内质网和高尔基复合体。核上方有较多的分泌颗粒,电子密度高、大小不等,直径约0.1-1.0μm颗粒内含有平行排列的板层状结构,称为嗜饿性板层小体。小体内的主要成分为磷脂,以二棕榈酰卵磷脂为主,此外还有糖胺多糖及蛋白质等。颗粒内物质释放出来后,在肺泡表面形成一层粘液层,称为表面活性物质(surfactant)。表面活性物质有降低肺泡表面张力、稳定肺泡大小的作用。呼气时肺泡缩小,表面活性物质密度增加,表面张力降低,防止肺泡过度塌陷;吸气时肺泡扩张,表面活性物质密度减小,肺泡回缩力加大,可防止肺泡过度膨胀。表面活性物质的缺乏或变性均可引起肺不张,过度通气可造成表面活性物质缺乏;吸入毒气可直接破坏表面活性物质。Ⅱ型肺泡细胞有分裂、增殖并分化为Ⅰ型肺泡细胞的潜能,故具有修复受损伤上皮的作用。
    组织来源:小鼠肺泡组织
    产品规格:1×106/Vial(冻存细胞/干冰运输)或1×106/ T-25 flasks(活细胞运输)
    细胞纯度:>90%
    细胞活力:98%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
    细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
    培养信息:贴壁生长,成纤维细胞样
    细胞培养基:DMEM、 FBS、Penicillin、Streptomycin、细胞因子等
    细胞冻存:液氮冻存(完全培养基+10%DMSO+20%FBS)
    我们推荐使用TopBiotech的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基(货号:TOPMP0017)作为体外培养使用的培养基。 

    运输保存
    干冰运输:收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按指定条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
    常温运输:取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态;待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。 
    一、细胞复苏
    1. 将水浴锅预热至37℃。
    2. 用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
    3. 在超净工作台中按次序摆放消过毒的离心管、吸管、培养瓶等。
    4. 迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化,时间控制在1分钟左右。
    融解好的细胞迅速放进离心机中,2000r/min 或者600g离心2min。
    5. 用4-5ml完全培养基重悬细胞,吹打制成单细胞悬液,细胞浓度以5×105/ml为宜。
    6. 将复苏好的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内,8-24小时后换液继续培养,换液时间由细胞生长情况而定。
    二、传代培养
    1. 细胞吸除或倒掉原瓶中的旧培养基(以25mL培养瓶为例)。
    2. 每瓶加入2mL 的PBS,漂洗一次后倒掉。
    3. 每瓶加入1mL消化液(0.25%胰蛋白酶或0.02%EDTA或混合液),轻轻摇动培养瓶,经消化液铺满所有细胞表面,待细胞层略有松动,肉眼可观察到“薄膜”现象时,倒掉消化液,再继续作用2~3分钟,轻轻摇动,细胞层可随残留的消化液呈片状从瓶壁上脱落下来,在显微镜下可发现细胞回缩变圆,细胞间隙增大,此时应立即终止消化。
    4. 加入完全培养基5mL,用吸管反复吹打瓶壁上的细胞,吹打时要按顺序进行,以确保所有瓶壁均吹打到,吹打时动作要轻柔,不要用力过大,尽可能不要出现泡沫,以避免细胞的机械损伤。
    5. 细胞用计数板计数,计算细胞的浓度,并用培养基调整适当的细胞浓度后再分瓶培养。
    三、细胞冻存
    1. 配制含10%DMSO、10~20%小牛血清的冻存培养液;
    2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。
    3. 去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;
    4. 消化完成后加入完全培养基终止消化,收集细胞悬液1000rpm离心5min;
    5. 去除上清,加入适量冻存培养液后轻轻吹打使细胞均匀,计数并调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;
    6. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml,在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
    7. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,最后取出冻存管,移入液氮容器内。
    四、 注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后每天拍照记录细胞生长状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
    备注:该细胞只可用于科研,由于实验所用试剂、 操作环境及操作手法的不同, 以上方法仅供各实验室参考。 
     
     
     
     

     
     

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