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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
泽叶生物
- 肿瘤类型:
见说明书
- 细胞类型:
细胞系
- 品系:
见说明书
- 相关疾病:
见说明书
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
贴壁;上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 器官来源:
人
- 运输方式:
干冰运输及发送复苏存活细胞
- 年限:
2年
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
株
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:支气管上皮细胞可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
如何去除原代培养中的成纤维细胞
培养细胞的纯化:1、自然纯化:即利用某一种类细胞的增殖优势,而排挤其他细胞生长,靠自然的增值潜力最后留下生长优势细胞,去除其他细胞。有些恶性肿瘤细胞可以通过此方法,自然纯化建立细胞系。
2、人工纯化(1)酶消化法:在消化培养细胞时,常是成纤维细胞先脱壁,而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,特别是在原代培养和培养早期这种差别尤为明显,因而可以利用这种差异采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开。
(2)机械划除法:支气管上皮细胞原代培养成功后,上皮细胞和成纤维细胞所数都同时出现,混杂生长。这种混杂生长常常分区成片,每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。因此可以采用机械的方法去除不需要的细胞。
(3)反复贴壁法:成纤维细胞与上皮细胞相比,其贴壁过程快,大部分细胞常能在短时间内大约10-30min完成附着过程,而上皮细胞大部分在短时间内不能附着或附着不稳定,稍加振荡即浮起,这样可以利用此差别来纯化细胞。
(4)克隆法:采用细胞克隆法将细胞分成单个细胞,使之分别生长成克隆,选择出所需要的克隆。
(5)支气管上皮细胞培养及限定方法:某些细胞在生长过程中必须存在或必须去除某种物质,否则无法生长,可以利用这种技术来纯化细胞。
(6)流式分选。
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文献和实验实验材料: 1. 手术切除的含支气管的正常肺组织 2. 胰蛋白酶/EDTA液:0.05%胰蛋白酶,0.5mmol/L EDTA 3. 6孔培养板:用多聚赖氨酸包被 4. 不含Ca2+ 和Mg2+的1×PBS(pH=7.2),添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4 5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 6. 离心管(15ml、50ml) 实验方法: 1. 将分离的两片肺叶组织用含双抗的1×PBS
佚名 支气管管壁结构和功能与气管相似。气管分为左、右气管后,管径变细,管壁变薄,三层分界更不明显。支气管壁内的软骨环较少,形态也渐不规则,或环绕成环行,或体积变小呈不规则软骨片;平滑肌则逐渐增多,螺旋形排列,肌肉收缩有利于分泌物排出。 气管和支气管反复感染或受有害气体(如长期吸等)刺激,粘膜可发生慢性炎症病变。如纤毛细胞减少,纤毛运动减弱,杯状细胞增多
冲洗,以除去血液和粘液。 2. 将气管或支气管的一端结扎,另一端插套管并固定。用注射器经套管注入1%中性蛋白酶,至气管充盈为止。将气管浸泡于PBS中,在37℃条件下消化20min。 3. 用注射器抽取培养液,将注射器插入套管,反复冲洗,以分离气管上皮细胞。然后,将气管或支气管游离端的结扎线剪断,回收管腔内的细胞悬液。 4. 用200目不锈钢网筛过滤,将滤液离心(1000r/min,10min)。弃上清液后,再用培养液洗涤离心1次。 5. 用培养液悬浮沉淀细胞,调整细胞
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