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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 供应商:
泽叶生物
- 检测范围:
0.156-10ng/mL
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
酶联免疫实验
- 适应物种:
Mus musculus mouse
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
血清、血浆及相关液体
- 规格:
96T/盒
上海泽叶生物试验以h.GDF-15为例,总结以下美国ImmunoClone检测试剂盒的技术质控的数据,
1.OD值:
正常保存条件下有效期内和超过有效期2个月所测OD值比较
正常有效期内OD值: 3.251,2.845,2.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08
超过2个月有效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07
2.回收率:分别于定值血清及血浆中加入一定量的h.GDF-15标准品,重复测定并计算其品均值,回收率为测定值与理论值的比率。
3.线性:分别于定值血清及血浆中加入一定量的h.GDF-15标准品,并将标本按1:2,1:4,1:8稀释,线性范围即为稀释后样本中h.GDF-15含量的测定值与理论值的比率。
批内差:取同一批次试剂盒对低值,中值和高值样本进行定量检测,每份样本测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值和SD值。
批间差:选取 3 个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定, 每个样本使用同一试剂盒重复测定 8 次,分别计算不同浓度样本的平均值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)
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264.7细胞极化培养及流式检测流程 通用准备:RAW264.7细胞复苏、传代扩增至对数生长期,消化收集后调整细胞密度至2.5×10⁵个/mL,铺板于合适培养板,使用完全培养基(含10%FBS的高糖DMEM)进行培养,于37°C、5% CO2培养箱中贴壁过夜。 M1极化:弃去旧培养基,更换为含LPS(300 ng/mL)和IFN-γ(200 ng/mL)的全培养基,或者直接使用M1型Raw264.7巨噬细胞极化培养和检测试剂盒(XJM004)继续培养24-48 h。诱导结束后收集细胞或上清,用于后续
染色30–40min 4、60%异丙醇快速分化背景,纯水漂洗 5、显微镜拍照 6、定性观察:脂滴被染成红色,可直观判断分化比例与脂滴大小分布。 7、定量检测:染色后的细胞用异丙醇洗脱结合的油红O,收集洗脱液后在 510 nm波长下测定吸光度(OD 值),OD 值与细胞内甘油三酯含量正相关,可量化比较不同组的分化程度。 3.BODIPY荧光染色(脂滴荧光标记) 绿色荧光标记中性脂质,可联合DAPI染细胞核,用于脂滴大小、数量统计。 4.生化定量:胞内甘油三酯TG含量 裂解细胞,使用TG检测试剂盒
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