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- 美国ATCC
- 美国
- ZY-M051
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
泽叶生物
- 肿瘤类型：
见说明书
- 细胞类型：
细胞系
- 品系：
见说明书
- 组织来源：
B淋巴细胞
- 相关疾病：
见说明书
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
见说明书
- 细胞形态：
贴壁；上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 器官来源：
人
- 运输方式：
干冰运输及发送复苏存活细胞
- 年限：
2年
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
株
| 产品编号 | 名称 | 规格 | 价格 | 产品说明书 |
|---|---|---|---|---|
| ZY-M051 | P3/ag；小鼠骨髓瘤细胞 | 1×10^6 cells/瓶 | 询价 | 下载 |
细胞名称：P3/ag 小鼠骨髓瘤细胞
组织来源：B淋巴细胞；浆细胞；骨髓瘤
培养条件：DMEM +10% FBS
形 态：悬浮；淋巴母细胞
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备培养基；北美胎牛血清，10%；双抗1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二． P3/ag细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
1. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若P3/ag细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
2. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
3. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项：
1. 收到P3/ag细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置数小时（4h左右），稳定细胞状态，切忌在温箱内静置过夜。
3. 静置后镜检，拍照，记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。
4. 贴壁细胞：若细胞密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，收集细胞瓶内的培养基，留8ml继续培养至80%左右再传代，瓶盖可稍微拧松。
5. 细胞瓶内的培养基含血清和双抗，可收集后4℃保存备用，可补加2%血清。刚开始传代时建议一半用细胞瓶内的培养基，一半用客户自备的培养基，使细胞逐渐适应培养条件，以免因不适应而造成生长状态不佳。
6. 细胞胰酶消化液建议使用PBS配制，
7. 因为细胞培养过程外因太多，所以我们的售后保障期为一周，超过一周的细胞我们会酌情处理，但不提供免费更换服务。
P3/ag细胞运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
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文献和实验与小鼠骨髓瘤细胞（P3-X63/Ag8）融合，融合的细胞既获得了亲代脾细胞分泌特异性抗体的特性，又具有骨髓瘤细胞大量繁殖的能力，成为一种既能分泌特异性抗体又能长命的杂交瘤细胞。该技术为抗体的分子生物学研究提供了全新的手段。极大地促进了免疫学，遗传学，分子生物学的快速发展。 但传统抗体目前也面临诸多问题，如： 每使用一管新抗体都需要进行滴定测试； 多种同型对照，实验设计繁琐； 需要添加Fc阻断试剂； 抗体不佳，阳性细胞群不明显； 抗体作为细胞生物学和生物化学中最重要的试剂之一，科学界每年在这类
4-1是NS1/1的亚系，抗8-Ag(20μg/ml)，在HAT培养液中死亡。 2．小鼠P3-X63-Ag8。是Kohler和Milstein首次获得产生McAb杂交瘤所用的骨髓瘤细胞系。来源：它来自BALB/c小鼠的P3（MOPC21）骨髓瘤细胞系，分泌IgG1(K),抗8-AG（20μg/ml），在HAT培养液中不生长。 3．小鼠P3-X63-Ag8.653(1979年Kearney)。是P3-X63-Ag8的亚克隆，不可逆地丧失表达免疫球蛋白rl重链和K轻链的能力，其生长特性、融合
Nature 解读：David R. Liu 等通过体内碱基编辑实现治疗小鼠Hutchinson-Gilford早衰综合征
，它由哪些部分组成？ABE 的核心组成元件是 Cas9 和人工定向进化的腺嘌呤脱氨酶，Cas9 与腺嘌呤脱氨酶组成融合蛋白。ABE 的作用原理是，Cas9 与腺嘌呤脱氨酶组成的融合蛋白在 sgRNA 的引导下靶向基因组 DNA 时，腺嘌呤脱氨酶可结合到 ssDNA 上，将一定范围内的腺嘌呤 (A) 脱氨变成肌苷 (I)，I 在 DNA 水平会被当做 G 进行读码与复制，最终实现 A・T 碱基对至 G・C 碱基对的直接替换。 图片来源：NatureABE 纠正 HGPS 患者细胞突变的效果怎么样？研究者选择
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