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- Pharmcogenomics TM 001
- 2025年07月13日
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-20度冻存
- 英文名：
ALDH2 SSP Typing Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
wehelp
- 规格：
48 人份/盒
通用名称： 人类乙醛脱氢酶 2 基因分型试剂盒（ SSP 法）
英文名称： ALDH2 SSP Typing Kit
包装规格：
48 人份/盒
预期用途：
本试剂盒利用 PCR 序列特异性引物（ sequence specific primer， SSP）及扩增阻碍突变系统 （ Amplification refractory
mutation system， ARMS） 分析法，提供 ALDH2 基因型别鉴定。
乙醛脱氢酶( aldehyde dehydrogenase, ALDH)和乙醇脱氢酶( alcohol dehydrogenase, ADH) 在人体内共同组成了
人乙醇脱氢酶系， 负责催化人体的乙醇分解代谢。 ALDH2 在肝和胃中具有很高的表达量， 是乙醇代谢途径中最重
要的酶之一。研究发现， 突变型等位基因 ALDH2*2 的存在能导致 ALDH2 活力的严重缺失， 并与过度饮酒导致的
酒精依赖、酒精性中毒、酒精性肝病、消化道癌症等疾病之间存在深刻的联系。 过度的饮酒行为， 不仅使 ALDH2*2
携带者对酒精产生依赖， 还可能引起肝癌等的酒精性肝病(alcoholic liver disease, ALD)。研究显示，携带 ALDH2 突
变基因型者大量饮酒将显著增加患肝癌的危险性， 并且 ALDH2*2 与饮酒人群患消化道癌的风险之间具有明显的联
系。 此外，近来发现， ALDH2 与硝酸甘油转化为 NO 密切相关。有研究表明，野生型等位基因 ALDH2*1 的患者硝
酸甘油治疗心绞痛的疗效明显优于 ALDH2*2 患者，且前者迅速起效率也明显高于后者。
由此可见，对 ALDH2 基因进行分型实验，对提示饮酒危害，以及硝酸甘油的服用指导具有显著意义。 本公司
人类乙醛脱氢酶 2 基因分型试剂盒以序列特异性引物进行聚合酶链式反应用于 ALDH2 基因型别鉴定。
检测原理：
本试剂盒以序列特异性引物进行聚合酶链式反应， 用于人类乙醛脱氢酶 2 基因型别鉴定。 首先根据 ARMS 利
用 PCR 引物的 3’ 端末位碱基必须与其模板 DNA 互补才能有效扩增的原理， 由已知人类乙醛脱氢酶 2 基因序列设
计特异性引物，当引物序列与待测标的序列能完全匹配时，引物进行聚合酶链式反应。特殊核酸片段将被进行复制
与放大， 通过琼脂糖凝胶电泳显示出来。 电泳出现特异性条带表示在样本中存在与特异性引物匹配的基因序列，反
之则否。
同时在聚合酶链式反应试剂中，也加入了另外一对内部对照组的核酸引物， 用于证明聚合酶链式反应的正常进
行，当样本中的人类乙醛脱氢酶 2 基因片段被复制放大时，内部对照组基因核酸片段将有可能因放大效率的差异而
受到抑制。
主要组成成分：
1. 分型反应 8 连管 12 排， 每个检测需 2 孔， 共 48 个检测： 反应管中包含测定 ALDH2 基因型所需的特异性核酸引
物及内对照引物。
注： 8 连管上标记有数字 1 至 8， 依次每 2 孔进行一个测试。
2. 主反应液 Master Buffer，每管 1024μl，共 1 管
3. 8 连管盖 12 条。
储存条件及有效期;
本试剂盒在未拆封状态下可于-20℃环境存放 12 个月；为避免污染及反复冻融影响测试正确性，请将主反应液
根据使用习惯进行分装；拆封后未使用完的分型试剂管请妥善封存于原包装袋中， 并置回-20℃；分型试剂管如有破
损请勿使用。
设备需求：
适用于 ABI GeneAmp PCR System 9700 等基因扩增仪。
检验流程：
反应体系配制----荧光定量PCR反应----结果判读
结果判读：
以每 8 孔四个人份检测为例，按顺序每两孔检测一份样本， 一号孔对应野生型 ALDH2 等位基因，二号孔对应
突变型 ALDH2 等位基因
1. 质量控制：聚合酶链式反应正常进行， 不论有无特异性条带，皆有一内对照条带，大小约为 600bp 的 DNA
片段， 即图中第一排。
2. 待测样本判定： 一号孔野生型等位基因 ALDH2*1 反应孔内， 若为阳性反应会另有大小约为 150 bp 的 DNA
片段，若为阴性反应则否；二号孔突变型等位基因 ALDH2*2 反应孔内， 若为阳性反应会另有大小约为 150 bp 的
DNA 片段，若为阴性反应则否。所得电泳图比对上图， 可以获知样本的 ALDH2 基因型别。
3. 最下方为引物带。
4. 缺乏内部质控带，同时没有特异性扩增带表示实验失败，需要重新进行 PCR 扩增。
5. 检测结果与样本采样、 处理及保存条件有关，其中任何失误都将会影响结果判读。如果样本浓度过高，则电
泳图可能出现非特异性条带， 但条带较特异性条带浅 。
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文献和实验生物学技术的不断发展和对人类血小板抗原基因结构研究的突破性进展，使血小板基因分型更为简捷准确。笔者采用PCR序列特异引物技术（PCR-SSP）对HPA-1～4这4个比较重要的血小板抗原系统进行了基因分型研究。1、材料与方法1.1 样本 25名健康献血者静脉采血0.5ml，ACD抗凝。1.2 基因组DNA抽提 采用蛋白酶K消化，酚/氯仿抽提DNA。1.3 引物 DNA序列特异性引物设计参照文献方法，一共12条，合成序列见表1。内对照为人类生长激素（HGH）基因特异性引物，序列：HGH-1s
PCR － SSP 法 1 ）提取 DNA 同前 RFLP 法 2 ） PCR 扩增 操作方法基本同 PCR-RFLP ，但引物是根据各等位基因的核苷酸序列设计的特异性引物，主要是针对第二外显子区域的多态性，用 SSP 扩增出来的产物具等位基因特异性。 3 ）凝胶电泳
苷酸变异。在人类基因组中大概每 1000 个碱基就有一个 SNP , 人类基因组上的 SNP 总量大概是 3 ×10^6 个 。因此,SNP 成为第三代遗传标志, 人体许多表型差异、对药物或疾病的易感性等等都可能与 SNP 有关。SNP 根据其在基因中的位置，可以分为基因编码区、基因非编码区、基因间隔区（基因之间的区域）。由于基因序列的兼并性，编码序列中的 SNP 不一定会改变蛋白的氨基酸序列。编码区的 SNP 有两种类型: 同义和非同义。同义单核苷酸多态性并不影响蛋白质序列，而非同义的则会改变
