小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELI

产品名称：小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA Kit
检测范围：来电咨询（或者发邮件
检测目标：人/动物
样品形式：血清/血浆/细胞培养上清/其它生物液体(具体情况请咨询）
保存与运输：短期4℃/长期-20℃保存
应用范围：科研用检测试剂
试剂盒组成 小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA Kit

试剂盒组成	48孔配置	96孔配置	保存
说明书	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1个	1个
酶标包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
标准品	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
标准品稀释液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
链霉亲和素-HRP	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
生物素标记抗体	0.5ml×1瓶	1 ml×1瓶	2-8℃保存
显色剂A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
显色剂B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
终止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
浓缩洗涤液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃保存

注意事项
1从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

• 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差
• 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
• 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
• 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
• 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

洗板方法
手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中
标本要求 小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA Kit
1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
操作程序

• 标准品的稀释：(本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)

2.根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3.加样：1）空白孔，2）标准品孔：加入；3）代测样品孔：加入样本40ul，然后各加入抗体10ul，盖上封板膜，轻轻震荡混匀，37℃温育60分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.显色：每孔先加入显色剂A50ul，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
7.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
8.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后10分钟以内进行。
9.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。
保存条件及有效期：
保存：2-8℃。
有效期：6个月(2-8℃)。