北京现货BL21(DE3)化学感受态细胞供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货BL21(DE3)化学感受态细胞供应在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：20×100ul
编号：RFT111
储存条件：-70℃冻存六个月
产品简介：本公司生产的BL21(DE3)感受态细胞采用经特殊工艺处理得到，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108cfu/μg，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。
BL21(DE3)菌株介绍：特点：(1)T7 RNA 聚合酶基因的表达受控于λ 噬菌体DE3 区的lacUV5 启动子，该区整合于BL21 的染色体上。
(2)适用于T7、T7 lac 启动子的表达系统，如pET，pEASY。
(3) 适用于非毒性蛋白的表达。
(4) 使用pUC19 质粒DNA 检测，转化效率可达107 cfu/μg DNA。
操作方法：（以下操作均按无菌条件的标准进行）
1取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
以下实验以100 μl感受态细胞为例。
2 向感受态细胞悬液中加入目的DNA（50 μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30分钟。
3 将离心管置于42℃水浴中放置90秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3分钟，该过程不要摇动离心管。
4 向每个离心管中加入500 μl 无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素）， 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟（150转/分钟），目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5将离心管内容物混匀，吸取100 μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收，倒置平板，37℃培养12-16小时。
注：涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多，可取更少量转化产物涂布平板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200-300 μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少，可通过离心（4,000 rpm, 2分钟）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。（涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板）
注意事项：1. 感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免感受态细胞的转化效率。
2. 进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3. 为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到最低。

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8008-63-7 Bostaurusdomesticus 牛胆粉
8-羟基喹啉铜盐 Alizarin yellow R sodium salt 13014-03-4
ARB11939 大鼠5羟色胺(5HT)elisa检测操作说明书 ?Rat 5-hydroxytryptamine,5ht ELISA KIT
BTN130545 膦酰二肽溶液 Phosphoramidon Solution
PY02-441 D/E中和琼脂基础 250克
ARB10573 人百日咳毒素(PT)elisa测定使用说明书 Human pertussiu toxin,pt ELISA KIT
ARB10985 人卵泡抑素(FS)检测服务 Human follistatin,fs ELISA KIT
山梨酸钾 CyDTA 24634-61-5
F020204 山羊抗小鼠IgG2b抗体 Goat Anti-Mouse Ig2b
PY02-001 营养琼脂(NA) 250克
ARB14210 牛α干扰素(IFN-α)定量分析 Bovine interferon α,ifn-α ELISA KIT
DN3701 海洋动物组织基因组DNA快速提取试剂盒
N-氨乙基-3-氨丙基甲基二甲氧基硅烷 DL50 3069-29-2
2,6-二氯靛酚 TMPD 956-48-9
BTN120512 即用型蓝白T载体B型(T7-T3,有MCS) Instant Blue-White Vector T,Type B
对甲苯甲酸 TRIS-HC1 99-94-5
ARB10417 人丙二醛(MDA)elisa检测说明书 Human malondialchehyche,mda ELISA KIT
ARB11962 大鼠B因子(BF)检测服务 Rat factor b,bf ELISA KIT
ARB12679 大鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)尿液中含量检测 Rat annexin Ⅴ,anx-Ⅴ ELISA KIT
ARB11500 人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(AFABP)免费代测 Human adipocyte fatty acid-binding protein,a-fabp ELISA KIT
BTN130983 气相RNase清除剂 Air RNase Erasol
北京现货BL21(DE3)化学感受态细胞供应关键词：BL21,RFT111,DE3


·BCA蛋白定量试剂盒
编号：RFT057
规格：50次
● 试剂盒内容及保存：产品名称 包装 贮存方式
BCA试剂A 100 ml RT
BCA试剂B 3 ml RT
牛血清白蛋白(BSA)标准溶液（5 mg/ml） 2×1 ml -20℃
PBS溶液 10 ml 4℃
说明书 1份
● 储存条件和效期：试剂A和试剂B室温贮存；牛血清白蛋白标准溶液-20℃贮存；PBS溶液4℃贮存。本试剂盒有效期1年。
● 产品简介：
BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物，并将Cu2+还原成Cu+，而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物，并在562nm处有最大的光吸收值，该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。
本试剂盒可以检测500个样品（使用微孔板）或50个样品（使用试管）。
● 产品特点：1. 灵敏度高，检测浓度下限达到25μg/ml（在20-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系），最小检测蛋白量达到0.2μg，待测样品体积为1-20μl。
2. BCA法测定蛋白浓度的最大优点是蛋白浓度的测定可以耐受高浓度的去垢剂，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于0.01%。
● 操作方法
BCA工作液配制：将试剂A和试剂B按照体积比50:1比例混合，配成BCA工作液。
如，取50ml 试剂A与1ml试剂B混合，配成51 ml BCA工作液。
注：BCA工作液室温可放置一周不失效。
微孔板测定程序：（工作范围20-2000 μg/ml）
1. 蛋白标准品配制：室温完全溶解蛋白标准品，取20μl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液用PBS溶液稀释至100μl，使其终浓度为1.0 mg/ml。
2. 按照下表配制BSA标准测定溶液：编号 0 1 2 3 4 5 6 7 8
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl 5 mg/ml BSA 标准溶液 μl
BSA标准溶液 μl 0 0.5 2.5 5.0 10 15 20 6 8
PBS 溶液 μl 20 19.5 17.5 15 10 5 0 14 12
BSA终浓度 μg/ml 0 25 125 250 500 750 1000 1500 2000
总体积 μl 20 μl
3. 将适当体积的待测样品加入到微孔板中，并用PBS补足到20 μl
4. 向微孔板中加入200 μl BCA工作液，混匀，37℃放置30分钟；
注：也可以室温放置2小时，或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。
5. 测定562 nm 处的吸光值，并记录读数；以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。
6. 以A562为纵坐标，BSA含量为横坐标，绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内，请稀释样品后重新测定。
试管测定程序：（工作范围20-1000 μg/ml）
1. 蛋白标准品配制：室温完全溶解蛋白标准品，取150μl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液，加入600μl PBS溶液稀释至750μl，使其终浓度为1.0 mg/ml。
2. 按照下表配制BSA标准测定溶液：编号 0 1 2 3 4 5 6 7 8
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl 5 mg/ml BSA 标准溶液 μl
BSA标准溶液 μl 0 2.5 12.5 25 50 75 100 30 40
PBS 溶液 μl 100 97.5 87.5 75 50 25 0 70 60
BSA终浓度 μg/ml 0 25 125 250 500 750 1000 1500 2000
总体积 μl 100 μl
3. 将适当体积的待测样品加入到试管中，并用PBS补足到100 μl；
4. 向试管中加入2ml BCA工作液，混匀，37℃放置30分钟；
注：也可以室温放置2小时，或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。
5. 测定562 nm 处的吸光值，并记录读数；以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。
6. 以A562为纵坐标，BSA含量为横坐标，绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内，请稀释样品后重新测定。


北京现货BL21(DE3)化学感受态细胞供应关键词：BL21,RFT111,DE3


·pUC18载体
编号：RFT117
规格：2ug
贮存：-20℃
制品说明 ：pUC18 载体适用于双脱氧法对DNA 片段进行测序，它克隆的 DNA 片段比使用 M13 phage作载体时克隆的片段长。 由于在 lacZ 领域中含有多克隆位点， 因此可以在含有 IPTG、 X-Gal的平板培养基上通过蓝白筛选判断载体中有无 DNA 片段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因， 使用M13系列的通用引物对插入载体中的DNA*(代"片")段进行测序。
贮存溶液：10 mM Tris-HCl（pH8.0） ，1 mM EDTA。
链长：2,686 bp。
制备：使用 CsCl-EtBr 密度梯度超离心法纯化。
纯度：1. 含 70%以上的双链 Covalently closed circular DNA（RFI） 。
2. 用双脱氧测序法确认多克隆位点。
3. 确认 EcoR I，Sac I，Kpn I，Sma I，BamH I，Xba I，Sal I，Pst I，Sph I 和 Hind III
只有一个酶切位点。
用途：1. 外源基因的克隆以及使用 lac 启动子进行表达。
2. 使用 M13 系列引物进行 DNA测序。

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