北京促销T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ价格

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规格：10KU|2KU
编号：M0373L
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
特性:
将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
将单链腺苷化引物连接至 RNA 上，用于链特异性 cDNA 文库构建
概述:
T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ（T4 Rnl2tr KQ）能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到 RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP，但需预腺苷化接头。
T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2，截短型（M0242）的双点突变体。K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性，K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接（串联体和环）。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K，提高了酶的连接活性，使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。
连接反应的背景被降为最低是因为:不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性。该酶已用于二代测序 small RNA 的文库构建中，优化了接头的连接过程。
来源:
重组 E. coli 菌株，携带有 MBP 融合表达的质粒，该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前 249 个氨基酸编码。T4 Rnl2tr K227Q 将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 和 227 位置进行了突变，精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。
反应条件:
1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。
随酶提供的试剂:
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000
质保声明:
无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。
单位定义:
200 单位指 10 μl 反应体系中，25℃ 条件下，1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头（S1315）] 所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
浓度:
200,000 units/ml。
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·AfeI限制性内切酶
编号：R0652L
规格：1KU|200U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
Afel是Eco47lll的完全同裂酶。

·Quick-Load Purple 1 kb DNA Ladder
编号：N0552S
规格：125gel lanes
概述:
我公司的 2-Log、1 kb 和 100 bp DNA Ladder 现均提供四种不同剂型。您可以选择常规型的 Ladder、以非荧光紫色染料或者溴酚蓝为指示剂的 Quick-Load 型或含三种指示剂的 TriDye 型，便于观察 DNA 迁移。
优点:
• 直接上样
• 25℃ 条件下稳定
• 条带亮度均一
• 易于识别的参照带
• 样品粗略定量

·HEN1 miRNA 甲基转移酶
编号：M0228L
规格：5KU|1KU
特性:
siRNA 和 miRNA/miRNA 的 3´ 末端标记
概述:
HEN1 是植物 miRNA 甲基转移酶，可甲基化双链短 RNA 核糖末端。拟南芥中，miRNA 和 siRNA 的 3´ 核糖 2´ -0-甲基化就是由 HEN1 介导的。在 HEN1 突变体中，没有甲基化的 3´ 末端有 poly ( U )尾，预示 3´ 末端的甲基化可以保护小 RNA 免于尿苷化。纯化的 HEN1 既可甲基化 miRNA/miRNA 又可甲基化 siRNA 双链，特别是含有两个碱基突出的 21-24 个核苷酸的双链 RNA。HEN1 不能甲基化单链 RNA 或 DNA。
来源:
携带克隆有拟南芥 HEN1 基因的 E. coli 菌株。
反应条件:
25 μl 反应体系中加入:1X BalbBuffer 2
[10 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，1mM DTT，10 mM MgCl2，( pH 7.9 @ 25℃ ) ]，128 μM S-腺苷甲硫氨酸和 500 ng miRNA 复合体，37℃ 温育。
热失活:70℃ 10 分钟。
使用注意事项:
在 25 μl 反应体系中可完全甲基化高达 500 ng miRNA 复合体或 75 pmol 3´ 末端。
SAM 使用前应用 H2O 以 1:10 的比例稀释。标记 miRNA 时，可用 2 μl [14C] SAM 代替非同位素标记的 SAM，欲提高标记比活性，可降低 miRNA 的量。
单位定义:
1 单位指 37℃ 条件下，10 分钟将 1 pmol 甲基基团转移到双链 miRNA 上所需的酶量。
浓度:
50,000 units/ml。

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