Taq plus DNA聚合酶怎么卖

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括Taq plus DNA聚合酶怎么卖在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

产地：国产|进口
规格：500U|5×500U
编号：RFT103
品牌：百奥莱博
高效率、高保真DNA聚合酶
● 贮存
-20℃保存一年。
● 产品简介
Taq plus DNA Polymerase是由pfu DNA Polymerase和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成，具有扩增效率高，错配率低的特点。与Taq DNA聚合酶相比，Taq plus DNA聚合酶具有扩增长度长，保真性好的优点；与pfu DNA聚合酶相比，具有扩增速度快，反应效率高的优点。此酶具有比Taq DNA聚合酶约3倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A，可以通过TA克隆法进行克隆。
● 产品组成（RTS3102-02）
Taq plus DNA Polymerase（5U/μl） 100μl
10×Taq plus PCR buffer（含Mg2＋） 1ml
● 活性定义
1单位(U) Taq plus DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
● 酶贮存缓冲液
50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol
● 适用范围
适用于要求保真性和高效率的PCR反应，大多数情况下可以替代Taq DNA 聚合酶。
● 使用说明：1. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：成分 体积 终浓度
Template 0.1-1μg as you wish
Primer 1（10 μM） 1μl 200nM
Primer 2（10 μM） 1μl 200nM
10×Taq plus PCR buffer 5μl 1×
dNTP Mixture(10 mM) 1μl 200μM each
Taq plus(5 U/μl) 0.5-1μl 2.5-5U
ddH2O up to 50μl -
2. 混匀后，离心快甩将反应液收集到管底。
3. PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
4. PCR仪上执行以下程序：三步法：步骤 温度 时间 循环数
初始变性 94℃ 1-5 min 1
变性 94℃ 30 sec 25-40*
退火 Tm-5℃* 30 sec
延伸 72℃ 1 min/kb
最后延伸 72℃ 5 min 1
*注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件（温度、时间等）。
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·ECL发光Marker
编号：RFT042
规格：20次
● 储存条件：-20℃保存，开封后有效期12个月
● 产品简介：
ECL发光Marker是一种新型可视的 Western Blot（蛋白免疫印迹法）蛋白标准，可在同一膜上实现与目的蛋白同时显示，而无需任何附加步骤和额外的试剂。此蛋白标准由六种带有IgG 抗体结合位点的蛋白组成，分子量范围在 15-95kD。即用型，冰浴融解后即可使用。
● 使用说明：1．ECL发光Marker彻底溶解后，混匀上样（2-10 μl）；
2．待测蛋白样品上样；
3．常规聚丙烯酰胺凝胶电泳；
4．参照具体仪器说明，将蛋白转移至合适的膜上；
5．参照目的蛋白抗体说明书，进行膜封闭、一抗孵育、二抗孵育及相应的膜洗涤；
6．化学发光检测，具体方法参照相关产品说明。
● 注意事项：1．本产品为即用型产品，融解混匀后即可使用，无需加热等处理。
2．本产品的最优上样量与实验中所用抗体有关，来源不同的抗体与不同来源 IgG 的亲和力不同，见下表：种属来源 亲和力
人、兔、豚鼠、猴 ＋＋＋＋
小鼠、猪、狗、猫 ＋＋＋
驴、仓鼠 ＋＋
大鼠、山羊、绵羊、牛 ＋
● 问题及解决：ECL发光 Marker 的使用规范及其使用范围请详细阅读上文，下表列出了实验中可能出现的问题及相应的解决方法，敬请参考：问题 原因 解决方法
条带弱或者没有条带 上样量偏少 加大上样量
转膜不充分 参照仪器使用说明书，优化转膜条件，或使用蛋白预染 Maker判断转膜效果
检测系统所用试剂失效 确认使用的检测试剂正常工作，优化一抗、二抗及检测底物的反应条件（浓度、温度、时间）
抗体没有有效结合 ECL发光 Marker 不同来源的抗体及其亚型与 ECL发光 Marker的结合效果差异明显，请根据实验具体情况加以选择
条带过亮呈弥散状，甚至无法区分条带 ECL发光 Marker上样量偏多 减少上样量
抗体浓度过高 降低一抗、二抗使用浓度，优化抗体反应条件


Taq plus DNA聚合酶怎么卖关键词：Taq plus DNA聚合酶,RFT103,百奥莱博

·JM110化学感受态细胞
编号：RFT114
规格：20×100ul
储存条件：-70℃冻存六个月
产品简介：本公司生产的JM1110感受态细胞采用经特殊工艺处理得到，可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测，转化效率可达108cfu/μg，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。
JM110菌株介绍：基因型：rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacIq lacZΔM15]
特点：1.JM 110 是一种甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株，使DNA 不被甲基化，使用其转化所得到的质粒DNA，可被对dam、dcm 甲基化敏感的限制酶切割。
2.只适用于转化质粒DNA。
3.细胞具有硫酸链霉素(Strr) 抗性。
操作方法：（以下操作均按无菌条件的标准进行）
1取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
以下实验以100 μl感受态细胞为例。
2 向感受态细胞悬液中加入目的DNA（50 μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30分钟。
3 将离心管置于42℃水浴中放置45秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3分钟，该过程不要摇动离心管。
4 向每个离心管中加入500 μl 无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素）， 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟（150转/分钟），目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5将离心管内容物混匀，吸取100 μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收，倒置平板，37℃培养12—16小时。
注：涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多，可取更少量转化产物涂布平板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200—300 μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少，可通过离心（4,000 rpm, 2分钟）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。（涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板）
注意事项：1. 感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免感受态细胞的转化效率。
2. 进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3. 为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到最低。


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·2×Tricine多肽上样缓冲液（还原，2×）
编号：RFT063
英文名称：2×Tricine Loading Buffer (reducing，2×)
规格：5×1ml
产品简介
2×Tricine上样缓冲液是以溴酚蓝为染料，2倍浓缩的Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液，
应用于还原型Tricine-SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有DTT，可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫
键断裂，通过二硫键连接的各蛋白亚单位彼此分离，经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。
保存：-20℃
操作步骤
1. 将上样缓冲液（还原，2×）与蛋白样品按照1：1的比例混匀。
2. 将蛋白样品置于沸水浴中加热3-5分钟。
3. 待蛋白样品充分变性后冷却至室温，12000rpm，4℃离心3-5分钟。
4. 离心后，以微量进样器取适量上清，直接加入Tricine-SDS-PAGE凝胶加样孔内。
5. 进行常规电泳，通常染料到达距离凝胶底端0.5 cm-1 cm处即可停止电泳。
注意事项
1. 加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀，以确保溶液混合均匀。
2. 本试剂含有DTT，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
3. 本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

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