- ￥96 - 786
- 鼎国
- FLF01
- 2025年10月17日
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9999
- 供应商：
北京鼎国昌盛
- 规格：
50ml/500ml
| 规格： | 50ml | 产品价格： | ￥96.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500ml | 产品价格： | ￥786.0 |
Folin-酚法（Lowry法）原理：
蛋白质分子含有与双缩脲相似的肽键，在碱性条件下，与铜离子反应，结合生成蛋白质-铜络合物。加入福林酚试剂后，试剂中的磷钼酸盐-磷钨酸盐被蛋白质-铜络合物所含的酪氨酸和色氨酸等还原，形成深蓝色磷钼蓝和磷钨蓝混合物，产生550-750nm之间提高吸光度的色原体，颜色深浅与蛋白质浓度成正比，故可用比色的方法测定蛋白质的含量。在不存在铜离子的情况下，颜色深浅主要取决于蛋白质中酪氨酸和色氨酸的含量，在较小程度上由半胱氨酸和组氨酸决定。铜离子对酪氨酸、色氨酸或组氨酸的颜色形成没有影响，但会减少半胱氨酸导致的颜色形成。一般情况下，750nm或660nm处的吸光度用于定量较低的蛋白质浓度，而550nm处的吸光度用于定量更高的蛋白质浓度。
试剂盒技术指标：
本试剂盒可测定蛋白浓度0.05--1mg/ml。当蛋白浓度范围在0.05-0.5mg/ml范围时，线性关系最好。标准曲线相关系数：R2大于0.99.
试剂盒组成：
1.Folin—酚试剂甲
溶液I：2g无水碳酸钠和20mg酒石酸钠溶于100ml 0.2mol/l氢氧/化/钠中（已配制成5×，用时稀释5倍，使用完需另配)。
溶液Ⅱ：0.5g五水硫酸铜溶于100ml水溶液。
将稀释后的溶液I与溶液Ⅱ，以50：1的比例混合，混合后即为Folin—酚试剂甲，此试剂只能用一天，过期失效。
2.Folin—酚试剂乙
原液浓度为2moL/L使用前需稀释一倍，用多少稀释多少。使其最后浓度为1moL/L。此为Folin—酚试剂乙应用液。Folin—酚试剂乙原液平时应密封贮存于4℃冰箱中避光保存。
操作方法：
一、标准曲线的制作
取14支试管分成两组，按下表顺序加入试剂，混匀，于室温放置10分钟。再加入0.5毫升试剂乙，立即摇匀，在室温放置30分钟，然后于500nm处比色。测定光密度值。取两组测定的平均值，以蛋白质浓度为横座标，光密度值为纵座标，绘制标准曲线为定量的依据。
| 试剂/管号 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| BSA/ml（250ug/ml | 0 | 0.1 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
| 蒸馏水/ml | 1.0 | 0.9 | 0.8 | 0.6 | 0.4 | 0.2 | 0 |
| 试剂甲/ml | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
| 试剂乙/ml | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
二、样品测定：
（1）取 1 毫升样品溶液（约含 20-250微克多肽或蛋白质）加入 5 毫升试剂甲混匀， 于温室放置 10 分钟。
（2）加入0.5毫升试剂乙（Folin——酚），立即摇匀，于室温保温 30 分钟：然后500nm处比色，以 1 毫升水代替样品作空白对照。测定后，可以从标准曲线中查出未知样品浓度。
若用 0.5 厘米光程的比色杯进行比色，可按下面方法进行操作：取0.2 毫升样品溶液（约含 5-100微克多肽或蛋白质），加入 1 毫升试剂甲（可选用 0.3-0.5 厘米直径的小试管）混匀，10分钟以后，再加入 0.1 毫升试剂乙，立刻混匀，30 分钟后比色一般来说，若多肽或蛋白质浓度在 2-25 微克，则采用波长755nm，而 25 微克以上则采用 500nm 比色为宜。
注意事项：
1、本说明书适用于蛋白定量检测，如需用于其他实验，请按参考文献进行。
2、本产品仅用于科研，不可用于其他。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
鼎国试剂 Folin-酚蛋白定量试剂盒试剂 FLF01
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ml溴水 数滴开口继续沸腾15min，驱除过量的溴，冷却后溶液呈黄色微带绿色（如仍呈绿色，须重复滴加液体溴步骤）。稀释至1L，过滤，滤液置于棕色瓶保存。使用时用标准NaOH液滴定，以酚酞为指示剂，然后适当稀释（加水约1倍）使最终浓度为1mol/L。另外，如果money没有问题的话，可以直接买Sigma公司的Folin-酚试剂，有点贵。标准曲线的制备⑴ 取标准牛血清白蛋白2.50mg，溶于10ml蒸馏水中，使成250μg/ml。⑵ 按表8-2稀释。表8-2 标准曲线稀释方法成分 试 管 号
，过滤，滤液置于棕色试剂瓶中保存。使用时用标准NaOH滴定，酚酞作指示剂，然后适当稀释，约加水1倍，使最终的酸浓度为1N左右。 (责任编辑：大汉昆仑王)
（一）实验原理 这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin―酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是：?在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。Folin―酚试剂中的磷钼酸盐―磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深兰色（钼兰和钨兰
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