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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 宿主:
rabbit
- 库存:
大量
- 抗原来源:
拟南芥
- 适应物种:
拟南芥
- 供应商:
Hannotech
- 是否单克隆:
0
- 规格:
100 ul
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文献和实验或室温2h,激酶或磷酸酯酶活性分析建议用2 h室温孵育 12. 加入100μl Protein A琼脂糖珠来捕捉抗原抗体复合物,4℃缓慢摇动抗原抗体混合物过夜或室温1h,如果所用抗体为鼠抗或鸡抗,建议加2 μl"过渡抗体"(兔抗鼠IgG,兔抗鸡IgG) 13. 14000rpm瞬时离心5s,收集琼脂糖珠-抗原抗体复合物,去上清,用预冷的RIPA buffer洗3遍,800μl/遍,RIPA buffer有时候会破坏琼脂糖珠-抗原抗体复合物内部的结合,可以使用PBS 14. 用60μl
1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既可产生抗体,又可无性繁殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体,由于每种抗原都有几个抗原决定簇,用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体,即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来
-His6 抗体(Qiagen) 。 ( 4 ) 特异单克隆抗体,如大鼠抗 CPI 抗体(Affinity Bioreagents,Cholden, USA ) 。 ( 5 ) Cy3 标记的配体作为第二抗体,如兔抗小鼠 IgG 配抗 RGS-His6 —抗,或兔抗大鼠 IgG 配抗 TCP1 —抗( Dianova,Hamburg,Germany) 。 2. 在 FAST 点样片基上的多克隆抗体筛选 ( 1 ) TBS + Tween-20 ( TBST ) :10
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