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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT
- 保质期:
1年以上
- 英文名:
Epoxy activated Sepharose 6B
- 库存:
2天
- 供应商:
Solarbio
- CAS号:
E8260
- 规格:
25ml
说明:分离试剂
产品简介
环氧活化-琼脂糖凝胶6B以6%琼脂糖凝胶为基质,采用环氧活化的方法激活琼脂糖上的羟基,活化后即可直接用于各种配基的偶联。可用于各种含有氨基、巯基或羟基的亲和配基(蛋白质、多肽、氨基酸或糖等)的偶联。具有使用方便、偶联条件温和、偶联效率高和应用范围广的特点。
GRADE:BR
基质:6%高度交联琼脂糖凝胶
功能基团:epoxy
配基密度:20-40μmoles/mL drained matrix
平均粒径:90μm
最大流速:300cm/h
偶联条件:pH8-10,温度 4-45°C,时间1-16小时,可在水相和有机相中偶联
用途:亲和层析介质
性状:白色胶体;
储存温度:4-8°C
偶联步骤
该环氧活化琼脂糖凝胶介质可以和含有氨基、巯基或羟基的亲和配基的蛋白质、多肽、糖等物质偶联。具体的偶联方法如下(偶联BSA为例):
洗涤:用10-20倍胶体积的去离子水冲洗保存存储液中的环氧活化胶,除去存储液,抽干;
偶联:称取200mg BSA,溶于10ml 0.1M pH 9.0碳酸钠缓冲液,加入到洗涤抽干的活化胶中,在37℃摇床上振荡12-24h偶联,偶联完毕后将料液转移到砂芯漏斗中抽干;
封闭:将抽干的偶联BSA的胶加入到100 ml三角瓶中,加入30 ml 1 mol/L乙醇胺溶液。搅拌速度120 rpm,37 ℃条件下反应4h,然后将料液转移到砂芯漏斗中抽干。
清洗:然后依次用5倍的去离子水、0.1 M含0.5M NaCl的乙酸-乙酸钠缓冲液(pH 4.0)、去离子水、0.1M含0.5M NaCl的硼酸-四硼酸钠缓冲液(pH 8.0)和去离子水充分洗涤后,抽干。
保存:保存于4℃、20%乙醇溶液中。
注意事项:
1.不同配基的偶联方法与上面类似,但是反应的条件例如:配基加入量,反应时间,反应温度应根据配基的不同进行适当的调整;
2.可用碳酸盐、硼酸盐和磷酸盐缓冲液做为偶联缓冲液,但绝对不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的缓冲液。
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文献和实验,蛋白A 琼脂糖凝胶FF 有很好的稳定性,能耐受37 度3-5 天而对柱子的性能没有影响,是分离抗体的最佳选择。疏水色谱色谱填料苯基琼脂糖凝胶FF 以及DEAE 琼脂糖凝胶FF 也场用于抗体的分离,只是特异性不如重组蛋白A 琼脂糖凝胶FF 好。纯化IgG 抗原最有效的办法是免疫亲和,具体的方法是把抗抗原的IgG 直接偶联到环氧活化琼脂糖凝胶FF 上,然后直接高pH 吸附,低pH 洗脱就可以得到需要的抗原。对于高亲和力的抗体筛选,特别是小分子的半抗原,我们建议可以把半抗原偶联到环氧活化琼脂糖凝胶FF
SephadexG-10葡聚糖凝胶 G-10 分离范围Sephadex G-15 葡聚糖凝胶 G-15 分离范围Sephadex G-15 葡聚糖凝胶 G-15 分离范围Sepharose 6B 琼脂糖凝胶 6B 分离范围:1000-5000,适用于脱盐、肽与其它小分子的分离ConA-Sepharose ConA琼脂糖凝胶 分离范围:1000-5000,适用于脱盐、肽与其它小分子的分离Sephadex G-25 Medium 葡聚糖凝胶 G-25 中 分离
和Fc段分离。同时蛋白A琼脂糖凝胶FF也可用于血清中IgG的分离,得到不含抗体的血清,蛋白A琼脂糖凝胶FF有很好的稳定性,能耐受37度3-5天而对柱子的性能没有影响,是分离抗体的最佳选择。 疏水色谱色谱填料苯基琼脂糖凝胶FF以及DEAE琼脂糖凝胶FF也场用于抗体的分离,只是特异性不如重组蛋白A琼脂糖凝胶FF好。 纯化IgG抗原最有效的办法是免疫亲和,具体的方法是把抗抗原的IgG直接偶联到环氧活化琼脂糖凝胶FF上,然后直接高pH吸附,低pH洗脱就可以得到需要的抗原。 对于高亲和力的抗体
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