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POD
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9003-99-0
英文名:POD
别名:辣根过氧化物酶;过氧化酶
CAS号:9003-99-0
活力定义:Onepyrogallolunitwillform1.0mgpurpurogallinfrompyrogallolin20secatpH6.0at20℃
分子量:40000
性状:褐色冷冻干粉。
介绍:由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,HRP由多个同功酶组成,PH3~9,酶催化的最适PH因供氢体不同而稍有差异,但多在PH5左右。酶溶于水和58%以下饱和度硫酸铵溶液。HRP的辅基和酶蛋白最大吸收光谱分别为403nm和275nm,一般以OD403nm/OD275nm的比值RZ(德文ReinheitZahl)表示酶的纯度。RZ值越小,非酶蛋白就越多
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文献和实验HRP是一种分子量达44 000的糖蛋白,由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成,中性糖和氨基糖约占18%,主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。每一个HRP分子中含一个氯化血红素IX作辅基,该辅基在403nm波长处有最大吸收峰,而去辅基的酶蛋白在275nm波长处有最大吸收。HRP在403nm的OD值与275nm的OD值之比,也就是所谓的RZ(Reinheits Zahl)值。RZ值仅说明血红素基团在HRP中的含量,并非表示HRP制剂的真正纯度,而且RZ值高的HRP制剂,并不意味着酶活性也高
辣根过氧化物酶 horseradish peroxidase
缩写为FRP.为过氧化物酶之一种,含于辣根( horseradish)中。 1941年 F· Thcorell曾提取其结晶。将之吸入细胞或注入之后,以 3, 3′ -二氨基联苯( 3, 3′- diaminobenzidine)为底物进行作用时,在光学或电子显微镜下可以看到一定的标记。最早为 W. Straus( 1959)曾用以鉴别吞噬小体 Ph-agosome. K. Kristensson和 G. Olsson,( 1974)在对利用轴突内逆行运输的神经元、轴突分支的着染,并而用于
1. 8 mg 辣根过氧化物酶放入1 ml玻璃瓶,加入1 ml双蒸水溶解,液体呈棕色。 2. 放入一个磁力搅拌子,电磁搅拌同时逐滴缓缓加入新配制的 NaIO4 0.2 ml,室温下继续搅拌40 min,液体呈现草绿色。 3. 将全部溶液用滴管装入反复用去离子水冲洗的透析袋中,4 oC 对1 mM pH 4.4的NaAc透析过夜,中间换液3-4次,每次300 ml,溶液最终呈浅棕色。 4.
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