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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
23
- 供应商:
上海莼试
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 细胞类型:
A类
- ATCC Number:
详见说明书
- 品系:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 器官来源:
小鼠杂交瘤细胞
- 运输方式:
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
半贴壁生长
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;2B10G10D10F7
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生单克隆抗体。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes)10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C25
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
小鼠杂交瘤细胞;2B10G10D10F7操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
人 RAB40AL 基因全长ORF克隆 人 interleukin 8 基因全长ORF克隆
人 RAB40B 基因全长ORF克隆 食蟹猴 IL8 基因全长ORF克隆
人 RAB41 基因全长ORF克隆 狗 IL8 基因全长ORF克隆
人 RAB4A 基因全长ORF克隆 人 interleukin 8 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 RAB4B 基因全长ORF克隆 人 interleukin 8 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
Cynomolgus monkey RAB4B Gene cDNA Clone (full-length ORF Clone) 重组人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 (His 标签)
人 RAB5A 基因全长ORF克隆 小鼠 IL9 基因全长ORF克隆
人 RAB5B 基因全长ORF克隆 大鼠 IL9 基因全长ORF克隆
人 RAB5C 基因全长ORF克隆 人 IL9 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 RAB6B 基因全长ORF克隆 大鼠 IL9R 基因全长ORF克隆
人 RAB6C 基因全长ORF克隆 人 IL9R 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
Cynomolgus monkey RAB7A Gene cDNA Clone (full-length ORF Clone) 大鼠 ILF2 基因全长ORF克隆
大鼠 RAB7A 基因全长ORF克隆 人 ILF3 基因全长ORF克隆
大鼠 RAB8A 基因全长ORF克隆 人 ILK 基因全长ORF克隆
人 RAB8B 基因全长ORF克隆 小鼠 ILK 基因全长ORF克隆
人 RABEP2 基因全长ORF克隆 Cynomolgus monkey ILK Gene cDNA Clone (full-length ORF Clone)
人 RABGEF1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签 人 ILVBL 基因全长ORF克隆
人 RAC1 / MIG5 转录变体Rac1 基因全长ORF克隆 人 IMMT 基因全长ORF克隆
小鼠 RAC1 / MIG5 基因全长ORF克隆 Rat IMP4 Gene cDNA Clone (full-length ORF Clone)
人 RAC1 / MIG5 转录变体Rac1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签 人 IMPA1 基因全长ORF克隆
人 RAC2 基因全长ORF克隆 人 IMPDH2 基因全长ORF克隆
大鼠 RAC2 基因全长ORF克隆 大鼠 IMPDH2 基因全长ORF克隆
人 RAD1 基因全长ORF克隆 人 INA 基因全长ORF克隆
人 Rad17 转录变体1 基因全长ORF克隆 人 INCA1 基因全长ORF克隆
人 RAD51 转录变体3 基因全长ORF克隆 人 INF2 基因全长ORF克隆
人 RAET1G 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签 人 ING1 基因全长ORF克隆
人 RAET1L 基因全长ORF克隆 人 ING2 基因全长ORF克隆
人 Raf-1 基因全长ORF克隆 人 ING4 基因全长ORF克隆
小鼠 Raf-1 基因全长ORF克隆 人 ING5 基因全长ORF克隆
人 RALB 基因全长ORF克隆 人 INHA 基因全长ORF克隆
人 RALBP1 基因全长ORF克隆 重组小鼠 Inhibin beta A / INHBA / Activin A 蛋白 (His 标签)
人 RAMP1 基因全长ORF克隆 人 INHBA 基因全长ORF克隆
人 RAMP3 基因全长ORF克隆 小鼠 INHBA 基因全长ORF克隆
大鼠 RAMP3 基因全长ORF克隆 大鼠 INHBA 基因全长ORF克隆
人 RAMP3 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签 人 INHBA 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 RAN 基因全长ORF克隆 人 INHBA 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
Cynomolgus monkey RAN Gene cDNA Clone (full-length ORF Clone) 人 INHBA 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
大鼠 RAN 基因全长ORF克隆 重组人 Inhibin beta B / INHBB / Activin B 蛋白 (His 标签)
Cynomolgus monkey RANGAP1 Gene cDNA Clone (full-length ORF Clone) 人 INHBB 基因全长ORF克隆
R小鼠杂交瘤细胞;2B10G10D10F7t RAP1A Gene cDNA Clone (full-length ORF Clone) 人 INHBC 基因全长ORF克隆
人 RAP1B 基因全长ORF克隆 小鼠 INHBC 基因全长ORF克隆
人 RARA 转录变体1 基因全长ORF克隆 人 INHBE 基因全长ORF克隆
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文献和实验位点) VH5’IgG-GGGGCGGCCGC GTTTTGGCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA VH3’IgM-GGGGCGGCCGC TGACTCTCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA 4)小鼠VL3’端引物(引入NotⅠ酶切位点) VL5’-GCGGCGGCCGC AGCCCGTTT[G/T]ATTTCCA[A/G]CTT (2)从杂交瘤细胞提取RNA,反转录成cDNA,均按试剂盒说明书操作。
这首先要从抗体的产生来探讨。把某一抗原免疫某种动物而得到单抗或多抗。如果用经免疫过的动物的脾细胞获得杂交瘤细胞,则得到单克隆抗体,如果用动物的血清,则得到多克隆抗体。但从理论上说,这些抗体都应针对抗原来自的动物,例如如果用 人蛋白 抗原免疫小鼠,则这些 抗体 为鼠抗人。 由于一个大蛋白分子表面具有多种抗原决定簇,因此,免疫动物后,这些不同的决定簇分别诱导动物产生不同的 抗体
瘤来源的动物是相同品系,例如使用SP2/0骨髓瘤细胞时应该选用Balb/C小鼠,同时必须使用品系纯正的小鼠。 (2)培养基中加入了过高浓度的HAT,或者仅A的浓度过高或HT的浓度过低,建议用纯的骨髓瘤和已有的杂交瘤作HAT浓度筛选。 (3)培养基不正确或血清浓度不正确或使用了劣质血清。 (4)未正确制备饲养层细胞。参见本站有关饲养层细胞制备的部份。 (5)接种杂交瘤细胞的培养板过多。一般在5-20块96孔板为宜。 (6)融合后,未及时转移或稀释
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