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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
28
- 供应商:
上海莼试
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 细胞类型:
未定
- ATCC Number:
详见说明书
- 品系:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 器官来源:
杂交瘤细胞株
- 运输方式:
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
悬浮生长
细胞名称 杂交瘤细胞株;2D1C11
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
杂交瘤细胞株;2D1C11操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
Anti-MAFbx/Fbx32/Atrogin-1/FITC 荧光素标记泛素蛋白连接酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Mafa/FITC 荧光素标记v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A抗体()IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-MAdCAM-1/Biotin 生物素标记粘膜血管定居因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-MAdCAM-1/FITC 荧光素标记粘膜血管定居因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Mad1/FITC 荧光素标记Mad1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Phospho-PKM2 (Tyr105) /FITC 荧光素标记磷酸化丙酮酸激酶M2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-M2-PK /FITC 荧光素标记丙酮酸激酶-M2(小鼠来源抗体)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-M2-PK /FITC 荧光素标记丙酮酸激酶-M2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LYVE-1/FITC 荧光素标记淋巴管内皮透明质酸受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Phospho-Lyn (Tyr497) /FITC 荧光素标记磷酸化膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Phospho-Lyn (Tyr396) /FITC 荧光素标记磷酸化膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) /FITC 荧光素标记膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Lysozyme/FITC 荧光素标记溶菌酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LY-96/MD-2/ESOP-1/FITC 荧光素标记MD-2蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LY-86/MD-1/FITC 荧光素标记MD-1蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Ly-6G/FITC 荧光素标记淋巴细胞抗原6G抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-ATEXPA10 /FITC 荧光素标记 植物延长蛋白(拟南芥)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Lxn(Latexin)/FITC 荧光素标记羧肽酶抑制剂抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LTB4-R2/FITC 荧光素标记白三烯B4受体2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LTB4-R1/LTB4R/FITC 荧光素标记白三烯B4受体1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LTB4/Leukotriene B4/FITC 荧光素标记白三烯B4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LRRK2 /FITC 荧光素标记富亮氨酸重复激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LRRC4/FITC 荧光素标记脑瘤相关基因抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LRP6/FITC 荧光素标记低密度脂蛋白受体相关蛋白6抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Phospho-LRP6 (Ser1490) /FITC 荧光素标记磷酸化低密度脂蛋白受体相关蛋白6抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LRP1/CD91/FITC 荧光素标记低密度脂蛋白相关受体1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LRP/MVP /FITC 荧光素标记肺耐药相关蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LRIG3杂交瘤细胞株;2D1C11/FITC 荧光素标记抗LRIG3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-LRIG2/FITC 荧光素标记抗LRIG2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
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文献和实验隆抗体亚类的鉴定:将单抗培养上清液浓缩,与抗鼠IgG亚类血清作双扩散试验。 1.6 免疫转印:APT经SDS-PAGE分离,在电转移系统中将凝胶蛋白转移至硝酸纤维素膜上,分别与各株单抗反应,浸入辣根过氧化物酶标记的IgG,最终以联苯二胺系统显色[见:顾方舟主编.淋巴细胞杂交瘤技术的应用.北京:人民卫生出版社,1985:23-25]。 2 结果 2.1 杂交瘤细胞株的建立:含阳性血清小鼠的脾脏细胞与NS-1细胞融合,悬于HAT选择性培养基中接种于24孔和96孔板,5 d左右见
ELISA。 2、首先初筛出能分泌与预定抗原起反应的McAb杂交瘤细胞,再进一步从中筛选出有预定特异性的杂交瘤细胞,然后选出可供实际应用,具有能稳定生长和有功能特性的细胞克隆。而且应尽量多选数株细胞,以保证有足够的候选株供实际应用。 3、克隆化技术 为了防止无关克隆的过度生长,对阳性孔需进一步克隆化。常用的克隆方法有:有限稀释法、软琼脂法、直接挑取法及荧光激活细胞分离仪(FACS)分离法。以前两种方法最为常用。 (1) 有限稀释法:将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞
嵌合基因的构建(RT-PCR方法扩增VL、VH基因) 【材料和试剂】 (1) 分泌McAb的杂交瘤细胞(如分泌抗转铁蛋白受体的杂交瘤细胞株)。 (2) 细胞培养常用试剂、培养液、器皿。 (3) 总RNA提取试剂 Trizol Reagenz。 (4) cDNA合成试剂盒。 (5) DNA提取试剂及分子生物学技术所需其他试剂和溶液。 (6) 核酸修饰酶类:T4 DNA连接酶、TaqDNA聚合
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