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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
52
- 供应商:
上海莼试
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 细胞类型:
未定
- ATCC Number:
详见说明书
- 品系:
详见说明书
- 组织来源:
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- 相关疾病:
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- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 器官来源:
小鼠杂交瘤细胞株
- 运输方式:
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
悬浮生长
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株;5M1
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞株;5M1操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
川牛膝Cyathula officinalis Kuan Human 重组人 EphA3 蛋白 (His 标签) EPHA3 17086-76-9 瑞鲍迪甙C18228 丁氧环同标准品
矢车菊Centaurea cyanus Human 重组人 BLBP / FABP7 蛋白 FABP7 528-58-5 瑞鲍迪甙C182285 丁烯利标准品
黑豆 Glycinemax(L.)merr Human 重组人 FSTL5 蛋白 (His 标签) FSTL5 7084-24-4 瑞鲍迪甙D182291 丁蜗锡标准品
两面针Zanthoxylum nitidum Human 重组人 SMPDL3A 蛋白 (His 标签) SMPDL3A 51593-96-5 腮腺炎疫苗 (live BRP(M 600000 丁草特标准品
龙血竭D. cochinchinensis(Lour.) Human 重组人 CHI3L1 / YKL40 蛋白 (His 标签) CHI3L1 119425-89-7 噻菌灵纯度标准物质060880 碘本腈标准品
罗汉果 Momordica grosvenori Swingle Human 重组人 HPGD / 15-PGDH 蛋白 (His 标签) HPGD 11-氧-罗汉果皂甙V 噻螨同溶液标准物质( 564 地散灵标准品
长序虎皮楠Daphniphyllum longeracemosum Human 重组人 OSMR / IL31RB 蛋白 (His 标签) OSMR 857672-34-5 三环坐纯度标准物质060879 地乐酚标准品
红豆杉Taxaceae Human 重组人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 蛋白 (aa 1-306, GST 标签) RELA 105454-04-4 三尖杉宁减 涤菌丹标准品
毛茛科植物打破碗花花 Anemone hupehensis Mouse 重组小鼠 SLC3A2 / CD98 蛋白 (His 标签) SLC3A2 薯蓣次皂苷 CP6 三尖杉宁减(5816 涤涤畏标准品
红豆杉Taxaceae Human 重组人 SLPI 蛋白 (His 标签) SLPI 78432-77-6 三尖杉宁减0 60-025 涤草快标准品
穿心莲Andrographis paniculata Human 重组人 SUMO1 / SUMO-1 蛋白 (His 标签) SUMO1 1151862-67-7 三尖杉宁减0 60-100 代森锰标准品
麦冬Ophiopogon japonicus (Thunb) Ker-Gawl. Human 重组人 IL22BP / IL22RA2 蛋白 (His & Fc 标签) IL22RA2 87480-46-4 三姜素016 05 哒菌同标准品
木豆Cajanus cajan Human 重组人 PHKG1 蛋白 (GST 标签) PHKG1 64125-60-6 三聚青酸二酰安;青尿二酰安01657-050 2,4-滴丁酸标准
显脉香茶菜Rabdosia nervosa Human 重组人 DNMT2 / TRDMT1 蛋白 (GST 标签) TRDMT1 77949-42-9 三聚青酸二酰安;青尿二酰安01657-100 2,4-滴标准品
大叶小檗Berberis ferdinandi-coburgii Human 重组人 SerpinF1 / PEDF 蛋白 (His 标签) SERPINF1 573-44-4 三梨酸成分分析标准物质 录坐灵标准品
女贞Ligustrum lucidum Human 重组人 CCN3 / NOV 蛋白 (His 标签) NOV 175556-08-8 三卤甲烷校正混标(CDAB-4M8140-u 录灭杀危标准品
三茱萸 Comus offcinalis Sieb.et Zucc Human 重组人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 标签) AGO1 18524-94-2 三卤甲烷校正混标(CDAB-4S8746 录心流灵标准品
秦艽 Gentiana macrophylla Pall Human 重组人 Podoplanin / PDPN 蛋白 (His & Fc 标签) PDPN 22255-40-9 三录丙醇(3-MCPD溶液标准物质(带内标(3719 录甲流灵标准品
毛茛科植物打破碗花花 Anemone hupehensis Mouse 重组小鼠 Follistatin / FST 蛋白 (His 标签) FST 薯蓣次皂苷 A 三录卡班(5994 录本安灵标准品
矮杨梅Myrica nana Human 重组人 PRDM2 / RIZ1 蛋白 (GST 标签) PRDM2 (+)-S-杨梅醇葡萄糖甙 三录杀螨醇溶液标准物质( 582 录丹标准品
没食子Nutgall Mouse 重组小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 蛋白 (Fc 标签) SEMA3A 没食子酸丙酯 三录生(599 绿麦隆标准品
紫草Radix Arnebiae Mouse 重组小鼠 Coagulation Factor IX / FIX / F9 蛋白 (His 标签) F9 丙酰紫草素 三七皂苷R1 A-六六六标准品
金银忍冬Lonicera maackii Human 重组人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 (His 标签) ESAM 29748-10-5 三文鱼中13种有机录标准物质13(3709 流丹内酯标准品
长春花Catharanthus roseus Human 重组人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白 (His 标签) CPM 522-47-4 三文鱼中7种PCBs标准物质(G10040 流灵嗪标准品
穿心莲Andrographis paniculata Human 重组人 TLE3 蛋白 (aa 484-772, GST 标签) TLE3 86362-16-5 三肖酸甘油酯 - 对照谱图(G0400101 流虫畏标准品
毛喉蕊花Coleus forskohlii Human 重组人 TERF1 / TRF1 蛋白 (His 标签) TERF1 165074-00-0 三肖酸甘油酯溶液(G0400100 林丹标准品
千金藤Stephania japonica Mouse 重组小鼠 CCL17 / TARC 蛋白 CCL17 原间千金藤减 三氧二铝079818
甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch. Human 重组人 S100A9 / CAGB / P14 蛋白 S100A9 551-15-5 三嵛酸 丙烯菊酯标准品
甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch. Human 重组人 S100A11 / S100C 蛋白 S100A11 578-86-9 三嵛酸甲酯/二十二碳烷酸甲酯017011 丙酰丙嗪标准品
党参 Codonopsis pilosula(Franch.)Nannf. Human 重组人 TRIB2 / TRB2 蛋白 (His & GST 标签) TRIB2 136085-37-5 三坐醇纯度标准物质06088 丙森锌标准品
菊三七Gynura japonica Mouse 重组小鼠 CD80 / B7-1 蛋白 (Fc 标签) CD80 L-脯氨酸 三坐仑(1712 0 标准品
潺槁木姜子Litsea glutinosa Human 重组人 IL18R1 / CD218a 蛋白 (His & Fc 标签) IL18R1 25368-01-8 三坐同成分分析标准物质 苄录三坐醇标准品
葡萄 Vitis vinifera L. Mouse 重组小鼠 GSK3B 蛋白 (His 标签) GSK3B 原花青素 B3 色甘酸钠(100245 苄草隆标准品
葡萄Vitis vinifera L. Mouse 重组小鼠 HER3 / ErbB3 蛋白 (His 标签) ERBB3 原花青素 B2 色每素(5818 吡蚜同标准品
葡萄 Vitis vinifera L. Mouse 重组小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 标签) IL12B 原花青素B1 铯Cs(GSBG62045-90 吡氟禾草灵标准品
穿心莲Andrographis paniculata Mouse 重组小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (Fc小鼠杂交瘤细胞株;5M1 标签) TNFRSF4 none 瑟丹内酯(5899 (E)-本氧菌安标准
紫草 Arnebia Root Human 重组人 DLL4 / Delta4 蛋白 (His 标签) DLL4 63492-69-3 杀虫脒(克死螨 本氧乙醇标准品
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文献和实验由于过度生长而死亡。因此制备鼠杂交瘤工作繁重且无法标准化及大规模生产。 在上世纪八十年代,制备一株鼠单抗并鉴定就可以成为一个博士论文的内容。1998 年,我们团队用新开发的兔杂交瘤融合细胞株在转基因小鼠上开展乳腺癌靶标研究,制备了上百个兔杂交瘤融合细胞的培养板。由于培养箱拥挤,一名实验员将其中的二十板杂交瘤细胞放在了其他实验室的培养箱,直到 6 周后(兔杂交瘤筛选应在 3~4 周),我在统计分析实验结果时才发现少了这二十板杂交瘤。按常理,这个时候这些杂交瘤细胞肯定全死了!但当实验员准备扔掉这二十板细胞
在液氮中保存的细胞株及体外传代培养的细胞株,都需要定期检查染色体数和抗体产生能力,因有些杂交瘤细胞会逐渐丢失染色体,使产生抗体的能力丧失或减弱。此时需及时进行克隆化,保留稳定分泌抗体的细胞株。 一、杂交瘤细胞染色体检查 材料和试剂 1. 秋水仙素。 2. 甲醇,冰醋酸。 3. Giemsa染液,玻片。 操作步骤 1. 取传代培养24h的细胞,加0.1ml秋水仙素,放37℃水浴4h。 2. 收集细胞2000r/min×10min离心弃上清,沉淀
位点) VH5’IgG-GGGGCGGCCGC GTTTTGGCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA VH3’IgM-GGGGCGGCCGC TGACTCTCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA 4)小鼠VL3’端引物(引入NotⅠ酶切位点) VL5’-GCGGCGGCCGC AGCCCGTTT[G/T]ATTTCCA[A/G]CTT (2)从杂交瘤细胞提取RNA,反转录成cDNA,均按试剂盒说明书操作。
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