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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
54
- 供应商:
上海莼试
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 细胞类型:
未定
- ATCC Number:
详见说明书
- 品系:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 器官来源:
小鼠杂交瘤细胞株
- 运输方式:
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
悬浮生长
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株;N2D1
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞株;N2D1操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr142) 磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr299) 磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr351) 磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-DOK2 D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DOK1 D酪氨酸激酶衰减蛋白1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DNA PKcs DNA依赖蛋白激酶催化亚基抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Dnmt3 Beta DNA甲基转移酶-3β抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Dnmt3a DNA甲基转移酶-3α抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Dnmt1 Dnmt1蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-DMBT1 抑癌基因抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DMT1 金属离子转运体1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-DKK3 抑癌蛋白DKK3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DKK1 抑癌蛋白DKK1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DLX4 DLX4抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DLK1 穿膜蛋白DLK1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DISC1(NT) DISC1 N端抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DISC1 (CT) DISC1 C端抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DIO2 脱碘酶2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-Desmin 结蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-polyprotein (DHAV) 鸭甲型肝炎A病毒抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-envelope glycoprotein (Dengue virus type-2) 登革热病毒抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Deltex-1 DTX1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DAPK3 凋亡相关蛋白激酶3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DAPK2 凋亡相关蛋白激酶2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DAPK1 凋亡相关蛋白激酶1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-DAP-5/p97 死亡相关蛋白5抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Defensin Beta 2 防御素β2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-Defensin Beta 2/DEFB2 防御素β2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-DEK DEK癌基因结合蛋白Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-Defens小鼠杂交瘤细胞株;N2D1in Beta 1 防御素β1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Defensin Beta 1 防御素β1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Defensin alpha 4 防御素α4抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
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文献和实验由于过度生长而死亡。因此制备鼠杂交瘤工作繁重且无法标准化及大规模生产。 在上世纪八十年代,制备一株鼠单抗并鉴定就可以成为一个博士论文的内容。1998 年,我们团队用新开发的兔杂交瘤融合细胞株在转基因小鼠上开展乳腺癌靶标研究,制备了上百个兔杂交瘤融合细胞的培养板。由于培养箱拥挤,一名实验员将其中的二十板杂交瘤细胞放在了其他实验室的培养箱,直到 6 周后(兔杂交瘤筛选应在 3~4 周),我在统计分析实验结果时才发现少了这二十板杂交瘤。按常理,这个时候这些杂交瘤细胞肯定全死了!但当实验员准备扔掉这二十板细胞
Koehler和Milstein合作,选择经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞和在体外培养的能持续繁殖的小鼠骨髓瘤细胞融合,最终获得具有两种亲本细胞各自特点的杂交细胞,建立了第一个B细胞杂交瘤细胞株,它既能分泌特异性抗绵羊红细胞抗体,又能在体外培养永久传代。他们在Nature杂志上联名发表的题为“分泌预定特异性抗体的融合细胞持续培养”的著名论文,宣告单克隆抗体的诞生,该项成果荣获1984年度诺贝尔医学奖和生理奖。近年来,随着基因工程抗体的问世,使其临床研究与应用获重大的突破。迄今,全世界已经研制成数以千计的单克
在液氮中保存的细胞株及体外传代培养的细胞株,都需要定期检查染色体数和抗体产生能力,因有些杂交瘤细胞会逐渐丢失染色体,使产生抗体的能力丧失或减弱。此时需及时进行克隆化,保留稳定分泌抗体的细胞株。 一、杂交瘤细胞染色体检查 材料和试剂 1. 秋水仙素。 2. 甲醇,冰醋酸。 3. Giemsa染液,玻片。 操作步骤 1. 取传代培养24h的细胞,加0.1ml秋水仙素,放37℃水浴4h。 2. 收集细胞2000r/min×10min离心弃上清,沉淀
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