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26
- 供应商:
上海莼试
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 细胞类型:
未定
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- 免疫类型:
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- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 器官来源:
小鼠杂交瘤细胞株
- 运输方式:
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
悬浮生长
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株;AFB1B5
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞株;AFB1B5操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
HIS(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升 石蜡切片冯库萨(VON KOSSA)钙染色试剂盒 50次
HISTONEH3蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次 石蜡切片甘油三脂脂酶法格莫瑞(Gomori)间接染色试剂盒 10次
HISTONEH3蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次 石蜡切片甘油三脂脂酶法格莫瑞(Gomori)直接染色试剂盒 20/50次
HIS标记蛋白纯化试剂盒5次 石蜡切片骨组织染色试剂盒 50次
HIS标记蛋白扩增试剂盒10次 石蜡切片核酸氧化8-羟基鸟苷(8-OHG)荧光染色测定试剂盒 10次
HIS钓饵(PULLDOWN)检测试剂盒5次 石蜡切片核酸氧化8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)荧光染色测定试剂盒 10次
HMMA高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20次 石蜡切片核酸氧化8-氧鸟苷(8-oxo-G)荧光染色测定试剂盒 10次
HOECHST33342和PROPIDIUMIODIDE细胞膜变检测试剂盒50次 石蜡切片核酸氧化8-氧脱氧鸟苷(8-oxo-dG)荧光染色测定试剂盒 10次
Hollande固着液50毫升 石蜡切片黑色素(MELANIN)染色试剂盒 50次
HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2次 石蜡切片黑色素去色试剂盒 50次
HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2次 石蜡切片红氨酸(RUBEANIC ACID)铜染色试剂盒 50次
H-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒6次 石蜡切片胶原纤维(GIESON)染色试剂盒 50次
HRP标记二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升 石蜡切片胶原纤维(MASSON)染色试剂盒 50/100次
HRP标记抗体稳定/稀释溶液10毫升 石蜡切片胶原纤维(SIRIUS RED)染色试剂盒 50次
HRP标记一抗50微克 石蜡切片胶原纤维戈德纳(GOLDNER)染色试剂盒 50次
HRP底物OPD缓冲溶液100毫升 石蜡切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞三色(MGT) 染色试剂盒 50次
HRP底物TMB缓冲溶液100毫升 石蜡切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞三色(MGT) 染色试剂盒 50次
HRP反应终止缓冲液100毫升 石蜡切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)格莫瑞(Gomori)染色试剂盒 50次
HRP生物素稳定/稀释溶液10毫升 石蜡切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)马森(MASSON)染色试剂盒 50次
HSV(HERPESSIMPLX)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2次 石蜡切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)摩罗利 (mallory)染色试剂盒 50次
HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2次 石蜡切片磷脂尼罗红(Nile Red)间接荧光染色试剂盒 10次
HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2次 石蜡切片磷脂尼罗红(Nile Red)直接荧光染色试剂盒 50次
HSV病毒DNA纯化试剂盒20次 石蜡切片磷脂皮尔斯(Pearse)间接染色试剂盒 10次
Humancytomegalovirus(HCMV)RFLP基因分析试剂盒20次 石蜡切片磷脂皮尔斯(Pearse)直接染色试剂盒 50次
humanherpesvirusesRFLP基因分析试剂盒20次 石蜡切片罗丹宁(RHODANINE)铜染色试剂盒 50次
HVA高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20次 石蜡切片免疫荧光显微镜基础检测试剂盒(无一抗和二抗) 50次
IGF蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次 石蜡切片免疫荧光显微镜间接检测试剂盒(含荧光二抗) 20次
IGF蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次 石蜡切片免疫荧光显微镜完全间接检测试剂盒(含一抗和荧光二抗) 10次
IKB-ALPHA蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次 石蜡切片免疫荧光显微镜直接检测试剂盒(含荧光一抗) 10次
IKB-ALPHA蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次 石蜡切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP基础检测试剂盒(无一抗和二抗) 50次
IKB-α(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 石蜡切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP间接检测试剂盒(含AP二抗) 20次
IL蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次 石蜡切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP完全间接检测试剂盒(含一抗和AP二抗) 10次
IL蛋白小鼠杂交瘤细胞株;AFB1B5免疫共沉淀分析试剂盒5次 石蜡切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP直接检测试剂盒(含AP一抗) 10次
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文献和实验由于过度生长而死亡。因此制备鼠杂交瘤工作繁重且无法标准化及大规模生产。 在上世纪八十年代,制备一株鼠单抗并鉴定就可以成为一个博士论文的内容。1998 年,我们团队用新开发的兔杂交瘤融合细胞株在转基因小鼠上开展乳腺癌靶标研究,制备了上百个兔杂交瘤融合细胞的培养板。由于培养箱拥挤,一名实验员将其中的二十板杂交瘤细胞放在了其他实验室的培养箱,直到 6 周后(兔杂交瘤筛选应在 3~4 周),我在统计分析实验结果时才发现少了这二十板杂交瘤。按常理,这个时候这些杂交瘤细胞肯定全死了!但当实验员准备扔掉这二十板细胞
Koehler和Milstein合作,选择经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞和在体外培养的能持续繁殖的小鼠骨髓瘤细胞融合,最终获得具有两种亲本细胞各自特点的杂交细胞,建立了第一个B细胞杂交瘤细胞株,它既能分泌特异性抗绵羊红细胞抗体,又能在体外培养永久传代。他们在Nature杂志上联名发表的题为“分泌预定特异性抗体的融合细胞持续培养”的著名论文,宣告单克隆抗体的诞生,该项成果荣获1984年度诺贝尔医学奖和生理奖。近年来,随着基因工程抗体的问世,使其临床研究与应用获重大的突破。迄今,全世界已经研制成数以千计的单克
在液氮中保存的细胞株及体外传代培养的细胞株,都需要定期检查染色体数和抗体产生能力,因有些杂交瘤细胞会逐渐丢失染色体,使产生抗体的能力丧失或减弱。此时需及时进行克隆化,保留稳定分泌抗体的细胞株。 一、杂交瘤细胞染色体检查 材料和试剂 1. 秋水仙素。 2. 甲醇,冰醋酸。 3. Giemsa染液,玻片。 操作步骤 1. 取传代培养24h的细胞,加0.1ml秋水仙素,放37℃水浴4h。 2. 收集细胞2000r/min×10min离心弃上清,沉淀
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