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- 上海莼试
- CS-002-1831
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- 2025年08月22日
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52
- 供应商：
上海莼试
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 细胞类型：
未定
- ATCC Number：
详见说明书
- 品系：
详见说明书
- 组织来源：
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- 相关疾病：
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- 物种来源：
详见说明书
- 免疫类型：
详见说明书
- 细胞形态：
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 器官来源：
小鼠杂交瘤细胞
- 运输方式：
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限：
详见说明书
- 生长状态：
半贴壁生长
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；AFB20084F3
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes)10%FBS
传代方法 1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞；AFB20084F3操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
蓝藻5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(SerotoninN-Acetyltransferase)活性比色法定量检测试剂盒20次 细胞氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因活性同位素薄层色谱(TLC)检测试剂盒 20次
蓝藻甲磺酸乙脂突变诱导试剂盒10次 细胞氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因活性同位素定量检测试剂盒 20次
蓝藻菌A+培养液500毫升 细胞氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因活性荧光薄层色谱(TLC)检测试剂盒 20次
蓝藻菌B-HEPES培养液500毫升 细胞氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因活性荧光定量检测试剂盒 20次
酪胺信号扩增试剂盒10次 细胞络氨酸磷酸酶(TP)活性比色法定量检测试剂盒 20次
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丽春红(PonceauS)溶液30毫升 细胞免疫荧光显微镜基础检测试剂盒(无一抗和二抗) 50次
链霉菌属基因组DNA纯化试剂盒20/50次 细胞免疫荧光显微镜间接检测试剂盒(含荧光二抗) 20次
两步法RT-PCR试剂盒20/50次 细胞免疫荧光显微镜完全间接检测试剂盒(含一抗和荧光二抗) 10次
两步法RT-PCR荧光定量试剂盒20/50次 细胞免疫荧光显微镜直接检测试剂盒(含荧光一抗) 10次
裂解液Ⅰ制备活性化亚细胞结构 细胞内蛋白氧化比色法测定试剂盒 20次
裂解液Ⅱ制备活性化细胞蛋白 细胞内钙离子水平动态变化荧光检测试剂盒 20次
裂解液Ⅲ各种活性化细胞制备处理 细胞内核酸氧化8-羟基鸟苷(8-OHG)比色法测定试剂盒 20次
裂解液Ⅳ不确保细胞内活性的成分制备 细胞内核酸氧化8-羟基鸟苷(8-OHG流式细胞分析试剂盒 10次
裂解液Ⅴ红细胞裂解液/白细胞分离 细胞内核酸氧化8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)比色法测定试剂盒 20次
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裂解液Ⅶ-1细菌裂解液 细胞内核酸氧化8-氧鸟苷(8-oxo-G)比色法测定试剂盒 20次
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裂解液Ⅸ真菌/酵母细胞裂解液 细胞内核酸氧化8-氧脱氧鸟苷(8-oxo-dG)比色法测定试剂盒 20次
裂解液Ⅸ真菌/酵母细胞超强裂解液 细胞内核酸氧化8-氧脱氧鸟苷(8-oxo-dG)流式细胞分析试剂盒 10次
裂解液Ⅹ真菌/酵母细胞活性化蛋白制备 细胞内氧化应激活性氧(ROS)比色法测定试剂盒(单线态氧气) 小鼠杂交瘤细胞；AFB20084F320次
裂解液ⅩI非变性细胞蛋白制备 细胞内氧化应激活性氧(ROS)初级绿色荧光测定试剂盒 100次
裂解液IX：真菌/酵母细胞超强裂解液20次 细胞内氧化应激活性氧(ROS)高质绿色荧光测定试剂盒 20次
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文献和实验位点） VH5’IgG-GGGGCGGCCGC GTTTTGGCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA VH3’IgM-GGGGCGGCCGC TGACTCTCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA 4)小鼠VL3’端引物（引入NotⅠ酶切位点） VL5’-GCGGCGGCCGC AGCCCGTTT[G/T]ATTTCCA[A/G]CTT (2)从杂交瘤细胞提取RNA，反转录成cDNA,均按试剂盒说明书操作。
这首先要从抗体的产生来探讨。把某一抗原免疫某种动物而得到单抗或多抗。如果用经免疫过的动物的脾细胞获得杂交瘤细胞，则得到单克隆抗体，如果用动物的血清，则得到多克隆抗体。但从理论上说，这些抗体都应针对抗原来自的动物，例如如果用 人蛋白 抗原免疫小鼠，则这些 抗体 为鼠抗人。 由于一个大蛋白分子表面具有多种抗原决定簇，因此，免疫动物后，这些不同的决定簇分别诱导动物产生不同的 抗体
瘤来源的动物是相同品系，例如使用SP2/0骨髓瘤细胞时应该选用Balb/C小鼠，同时必须使用品系纯正的小鼠。 （2）培养基中加入了过高浓度的HAT，或者仅A的浓度过高或HT的浓度过低，建议用纯的骨髓瘤和已有的杂交瘤作HAT浓度筛选。 （3）培养基不正确或血清浓度不正确或使用了劣质血清。 （4）未正确制备饲养层细胞。参见本站有关饲养层细胞制备的部份。 （5）接种杂交瘤细胞的培养板过多。一般在5-20块96孔板为宜。 （6）融合后，未及时转移或稀释
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