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- 2025年07月16日
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25
- 供应商：
上海莼试
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 细胞类型：
未定
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详见说明书
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- 组织来源：
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- 相关疾病：
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- 免疫类型：
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- 细胞形态：
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 器官来源：
杂交瘤细胞
- 运输方式：
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限：
详见说明书
- 生长状态：
半贴壁生长
杂交瘤细胞；H2H5为了回馈广大科研工作者长久以来对上海莼试的信任和支持，也为了使更多新老客户用到上海莼试的科研产品，公司推出开学季凡购买我们的细胞都可享受7折的优惠！
细胞名称 杂交瘤细胞；H2H5
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes)10%FBS
传代方法 1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
杂交瘤细胞；H2H5注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
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文献和实验1. 杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法，筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后，及时进行冻存。2. 单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
板液体每孔在 2ml 左右，不宜太多，或者太少。取两个 1.5mlEP 管，记为 A 管，B 管，每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I，然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000，B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA（见买来的 siRNA 说明书），然后静置 5min，混合在一起，静置 20min，用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内，混匀； 将六孔板里的细胞的液体吸出，用 PBS 清洗两遍； 将 ABC 混合液 2ml
在液氮中保存的细胞株及体外传代培养的细胞株，都需要定期检查染色体数和抗体产生能力，因有些杂交瘤细胞会逐渐丢失染色体，使产生抗体的能力丧失或减弱。此时需及时进行克隆化，保留稳定分泌抗体的细胞株。 一、杂交瘤细胞染色体检查 材料和试剂 1. 秋水仙素。 2. 甲醇，冰醋酸。 3. Giemsa染液，玻片。 操作步骤 1. 取传代培养24h的细胞，加0.1ml秋水仙素，放37℃水浴4h。 2. 收集细胞2000r/min×10min离心弃上清，沉淀
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