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- 上海莼试
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- 2026年01月09日
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上海莼试
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 细胞类型：
未定
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- 物种来源：
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- 免疫类型：
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- 细胞形态：
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 器官来源：
发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞
- 运输方式：
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限：
详见说明书
- 生长状态：
贴壁生长
细胞名称 发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞；G1
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes)10%FBS
传代方法 1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞；G1操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
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文献和实验细胞术可进行多参数分析，即同时测定一个细胞的多种性质。如散射光和荧光，或多种不同颜色的荧光。例如细胞经吖啶橙染色后，DNA 发绿色荧光，RNA 发红色荧光。测定这两种荧光就能同时得知一个细胞内的 DNA 和 RNA 含量。测定结果可用二维散点图或三维立体图表示。用这种方法可根据 DNA 和 RNA 含量而鉴别出 G0 与 G1、M 期和 G2 期细胞。用流式细胞术与液体闪烁技术相配合，还可求得细胞通过 G1、S 和 G2+M 期的时间 (T、Ts、T+M 及其变异系数。近年利用抗溴脱氧
Hela 细胞 DNA 含量分布曲线上，第一个峰是含有 2 C DNA 含量的 G1/G0（DNA 合成前期/静止期）细胞, 其次一个峰是 4 C DNA 含量的 G2 + M（DNA 合成后期＋有丝分裂期）细胞，从 2 C～4 C 间的区域为 S 期（DNA 合成期）细胞。采用绘图法或计算机拟合法可计算出细胞周期各时相细胞占整个细胞群体的百分数。 用流式细胞术可进行多参数分析，即同时测定一个细胞的多种性质。如散射光和荧光，或多种不同颜色的荧光。例如细胞经吖啶橙染色后，DNA 发绿色荧光，RNA
AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理：吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强，荧光更为明亮，均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异，很易判别。在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：活细胞(VN)，核染色质着绿色并呈正常结构；早期凋亡细胞(VA)，核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状；非凋亡的死亡
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