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37
- 供应商:
上海莼试
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 细胞类型:
A类
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- 免疫类型:
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- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 器官来源:
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
- 运输方式:
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
贴壁生长
细胞名称 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 此细胞株源自BALB/c小鼠由Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。可产生溶菌酶;sIg-, Ia-,Thy-1.2-。为检测到病毒颗粒的分泌,XC斑点形成试验阴性。该细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖;可以经抗体依赖分裂绵羊红细胞与肿瘤靶细胞;LPS或PPD处理2天可诱导分裂红细胞,但对肿瘤靶细胞无作用。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes)10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C150
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
FZD6 人 FZD6 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FZD9 大鼠 FZD9 基因全长ORF克隆 cDNA Rat
FZR1 人 FZR1 基因全长ORF克隆 cDNA Human
G0S2 人 G0S2 基因全长ORF克隆 cDNA Human
G6PC 大鼠 G6PC 基因全长ORF克隆 cDNA Rat
G6PD 人 G6PD 基因全长ORF克隆 cDNA Human
G6PD Rat G6PD Gene cDNA Clone (full-length ORF Clone) cDNA Rat
G6PD 人 G6PD 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签 cDNA Human
GAB1 人 GAB1 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GAB2 人 GAB2 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABARAP 人 GABARAP 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABARAP Cynomolgus monkey GABARAP Gene cDNA Clone (full-length ORF Clone) cDNA Cynomolgus
GABARAPL2 小鼠 GABARAPL2 基因全长ORF克隆 cDNA Mouse
GABARAPL2 大鼠 GABARAPL2 基因全长ORF克隆 cDNA Rat
GABRA3 人 GABRA3 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABRA4 人 GABRA4 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABRB1 人 GABRB1 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABRB2 人 GABRB2 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABRB3 人 GABRB3 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABRD 人 GABRD 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABRE 人 GABRE 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABRG1 人 GABRG1 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABRQ 人 GABRQ 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABRR1 人 GABRR1 基因全长ORF克隆 cDNA Human
GABRR2 人 GABRR2 基因全长ORF克隆 cDNA Human
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7GAD2 小鼠 GAD2 基因全长ORF克隆 cDNA Mouse
GADD45A 人 GADD45A 基因全长ORF克隆 cDNA Human
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文献和实验RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢,普通的方法根本就不可能将它消化下来,这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得,简介如下:消化液:0.5%胰酶、0.2%EDTA,实验前加温到37度以50ml培养瓶为例:1、细胞贴壁生长,长满瓶底80%时,弃去培养液,加D-HANKS 漂洗 两次;2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1-2ml,消化37℃约2-5min,镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化,弃消化液加D-HANKS 漂洗两次;3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
细胞学堂丨养不好RAW 264.7,是因为忽略了这几点,RAW264.7分化有哪些问题要注意
和培养器皿的材料也有关,有时RAW264.7细胞会出现太容易吹下的情况,连分化细胞都贴壁较松,此时更适宜用巴氏管吹打; 4. 培养时,无法保证100% 不分化,通过传代可以将分化比例控制在一定范围 5. RAW264.7细胞分裂活跃,记得每天看一看,周末也要抽点时间关心一下它哦~ 小知识 RAW 264.7细胞系的起源 加利福尼亚索尔克研究所的W. C. Raschke在雄性BAB/14小鼠腹腔注射A-MuLV(Abelson鼠科白血病病毒)诱发肿瘤的腹水中建立了RAW 264细胞
我养的是RAW264.7细胞株,前面有战友都提到过这种细胞的消化传代,但是因为这种细胞最大的特点是贴壁特别强, 每次传代都很难消化下来, 刚开始使用胰酶消化,发现37度, 消化15min细胞也还是吹不起来,后来又用单纯的用细胞刮刀刮的办法,但是这样养了一段时间,发现细胞损伤非常大,贴壁性变差,生长缓慢,后来使用了现在这个方法,到现在细胞的生长状况一直很好!简述如下:1) 将培养瓶内旧的培养液弃掉, 然后用D-Hanks液洗两次,(一定要洗干净,以免影响胰酶的消化作用)2) 加入0.25%胰酶
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