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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
20
- 生长状态:
贴壁细胞
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
不规则圆形
- 英文名:
RAW264.7
中文名称:小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
简称:RAW264.7
细胞培养条件:DMEM + 10% FBS
生长特性:□ 贴壁 □悬浮 □半悬浮半贴壁
形态:不规则圆形
来源:ATCC
是否通过STR鉴定:□是
背景资料:此细胞株源自BALB/c小鼠由Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。可产生溶菌酶;sIg-, Ia-,Thy-1.2-。为检测到病毒颗粒的分泌,XC斑点形成试验阴性。该细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖;可以经抗体依赖分裂绵羊红细胞与肿瘤靶细胞;LPS或PPD处理2天可诱导分裂红细胞,但对肿瘤靶细胞无作用。
本产品仅供科研!
RAW264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢,普通的方法根本就不可能将它消化下来,这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得,简介如下:消化液:0.5%胰酶、0.2%EDTA,实验前加温到37度以50ml培养瓶为例:1、细胞贴壁生长,长满瓶底80%时,弃去培养液,加D-HANKS 漂洗 两次;2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1-2ml,消化37℃约2-5min,镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化,弃消化液加D-HANKS 漂洗两次;3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
单核/巨噬细胞的分化成熟及组织分布 单核/巨噬细胞均来源于骨髓干细胞。发育成单核细胞后,进入血流分布于各种器官组织,并有不同的命名。如图2-12 单核巨噬细胞的组织分布 成熟的单核吞噬细胞表达多种表面分子.其中受体多达数十种,如免疫球蛋白的Fc受体FcyRI(CD64)、FcγRⅡ(CD32)、FcγRⅢ(CDl6),补体受体CRl和CR3和各种模式识别受体(包括甘露糖受体、清道夫受体、TLR),以及多种细胞因子、激素、神经肽、多糖、糖蛋白和脂蛋白的受体(图2―13),介导单核/
・ Lymphocyte Transformation (Donis-Keller lab) Lymphocytes are transformed to establish cell lines. Mononuclear cells (lymphocytes) from anticoagulated venous blood are isolated by layering onto histopaque
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