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冷藏
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长期
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764
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1mg/10mg
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应羊抗小鼠IgG(纯化抗体) 细胞及免疫学,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:XH093
规格:1mg/10mg
先以A蛋白纯化免疫球蛋白小鼠IgG,用此小鼠IgG免疫山羊,经过多次免疫后,测得山羊血清的效价达到要求后,动脉一次取血,静置得到血清,血清采用DEAE离子交换吸掉杂蛋白,再用硫酸铵沉淀,透析,定量等进一步处理得到纯化羊抗小鼠IgG抗体,此纯化抗体可以用于标记,免疫沉淀,ELISA等常规免疫学实验。
如果客户对抗体纯度要求更高,本公司可以定做免疫亲和纯化的抗体,以小鼠IgG结合在树脂上,吸附全部有活性的抗体,这样得到的抗体纯度更高,当然,成本也更高。
关于羊抗小鼠IgG(纯化抗体) 细胞及免疫学的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·细胞核提取试剂盒
编号:XH064
规格:50T/100T
二,说明
细胞核提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的细胞核。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的细胞核的制备。其制备物产量高,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶,性能稳定。
三,操作步骤
1. 样本处理
a. 组织匀浆:称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等,PBS或生理盐水冲洗,洗净血水,滤纸吸干,用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL预冷的Lysis Buffer,再加入50ul Reagent A , 0℃冰浴中上下研磨组织20次;有未研磨开的组织,可用双层纱布过滤。
b. 培养细胞匀浆:消化细胞,PBS洗涤,800 × g 5~10 min离心收集细胞。计数。每次提取需要5 × 107个细胞,加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞,再加入50ul Reagent A,将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内,0℃冰浴研磨细胞20~30次。
2. 将组织或细胞匀浆物转移到1.5ml离心管中,4℃,700× g 离心5 min。细胞核沉淀在收集管底部。加入0.5 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬沉淀;
3. 取另一新离心管内加入0.5 mL Medium Buffer,吸取上一步的重悬液,沿管壁小心地加入到此离心管中,置于Medium Buffer之上,4℃, 700 × g 离心5min。将上清转移到新离心管,细胞核沉淀在管底;
5. 弃上清,在细胞核沉淀中加入0.5 mL Lysis Buffer重悬细胞核沉,1000 × g 离心10min ,弃上清,得较纯的细胞核沉淀;
6. 用50-100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬细胞核沉淀,立即使用或-70℃保存。
四 注意事项:
1. 为保证获得完整的细胞核,第一是全程低温操作。第二是快速。第三,在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞是制备细胞核的最关键环节。与组织块相比,培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁,因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。
2. 以离心力g计算正确的离心速度,不同的离心机可据此精确计算离心速度。
3. 进行Western Blot和2D-胶电泳,可直接加入上样缓冲液裂解细胞核。
五 储存:四周内使用可4℃储存,长期置-20℃
转速与离心力换算
G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2
G为离心力,一般以g(重力加速度)的倍数来表示;
[rpm] 2即:转速的平方; R为半径,单位为厘米。
羊抗小鼠IgG(纯化抗体) 细胞及免疫学关键词:羊抗小鼠IgG,XH093,纯化抗体
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