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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
上海晶抗生物工程公司
- 检测范围：
科研试剂
- 应用：
用于科研试剂实验
- 样本：
血清、血浆、组织匀浆等液体样本
- 规格：
48T/96T
上海晶抗生物公司的人封闭蛋白(OCLN)ELISA试剂盒新现货产品也批发，打破行业ELISA试剂盒价格坚冰，促进市场良性发展，为国内科研尽绵薄之力。
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文献和实验一、原理 植物激素（planthormone）免疫定量主要有放射免疫分析（RIA）和酶联吸附免疫分析（ELISA），由于前者操作上欠安全等原因，目前常采用后一种类型。在ELISA中，抗原抗体反应的检测依靠酶标记物来实现，常用的酶有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酯酶。酶可直接标记激素分子，称为酶标植物激素，也可标记于第二抗体（识别抗激素抗体Fc片段的抗体或金黄色葡萄球菌A蛋白），称为酶标二抗。这两类标记物分别用于固相
。 聊完以上那些浅显的基本常识，接下来谈我认为最麻烦的： 首先，抗原抗体识别原理的物理学解释，抗体孵育过程实际上就是一个竞争结合的动力学过程。由于抗原和抗体特异性结合的效率是非特异性结合的数百万——数十 亿倍，所以当特异性抗体与非特异性‘抗体’（不好描述，指添加在抗体稀释液中的封闭蛋白，我们可以把它们看成非特异性的一抗）竞争时，尽管抗体稀释液中封 闭蛋白的浓度是一抗浓度20K：1以上，在碰撞几率相同的条件下，由于时间的积累加孵育过程中反复漂洗（孵育抗体要摇晃，对吧），特异性一抗积累了识别
过高，如何解决? 应该是多因素引起的：封闭不完全、显色过度、洗涤不充分、转移缓冲液或设备有污染、抗体稀释度不对或抗体不纯。 封闭不完全：一抗或二抗只要结合到膜上，就会显色。为了避免非特异性的结合，应用封闭液孵育膜，使所有的空白位点都被封闭蛋白占有。NC膜推荐的封闭液是3%的明胶。在室温孵育1小时。明胶不能再4℃孵育，因为会凝结。如果想在低温封闭的话，可以用3%的BSA 。PVDF膜推荐的封闭液是5%的脱脂奶粉。脱脂奶粉不能与Bio-Rad生物素化的蛋白标准一起使用。脱脂奶粉浓度
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