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冷藏
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长期
- 库存:
725
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
30μl
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应EMSA探针-STAT3(10μM)折扣价,我公司销售全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:30μl
编号:YT254
EMSA探针-STAT3是用于EMSA(也称gel shift)研究的STAT3 consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的STAT3结合位点,可以用作EMSA研究时的探针。
STAT3 consensus oligo的序列如下:
5"-GAT CCT TCT GGG AAT TCC TAG ATC-3"
3"-CTA GGA AGA CCC TTA AGG ATC TAG-5"
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。
一个包装的探针可以进行约90个同位素标记探针的反应,每次标记的探针可以测定约100个样品;或约可以进行60个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争(cold competition),可以进行90-180个冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
EMSA探针-STAT3(10μM)折扣价正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·Western一抗二抗去除液(中性)
编号:YT073
英文名称:Western Stripping buffer
规格:250ml
Western一抗二抗去除液,用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本Western一抗二抗去除液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。
使用本试剂只需大约20-30分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。
不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
保存条件:
4℃保存,两个月有效。-20℃保存,一年有效。
注意事项:
使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
本Western一抗二抗去除液仅适用于PVDF膜。用于硝酸纤维素膜时会导致转移到膜上的蛋白有非常显著的损失。
使用ECL、BeyoECL等类似的化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
使用说明:
1. 在完成Western化学发光检测后,蒸馏水中漂洗5分钟。
2. 弃蒸馏水,加入适量的Western一抗二抗去除液(中性),至少需把膜完全覆盖。在摇床上漂洗10分钟。
3. 弃Western一抗二抗去除液(中性),并吸尽残余液体。加入TBS、TBST或PBS漂洗3-4次,每次在摇床上漂洗3-5分钟。
4. 进行封闭(blocking)等Western的后续操作。
EMSA探针-STAT3(10μM)折扣价关键词:EMSA探针-STAT3,YT254,10μM
·一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)
编号:YT135
英文名称:One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit(Green)
规格:20次|50次
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织,只要经过一步染色反应,洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL(TdT--mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。注:FITC是fluorescein isothiocyanate的缩写,实际上大多数情况下所谓的FITC即为fluorescein。
本试剂盒有如下优点。(1)高灵敏度:背景染色极低,阳性染色明亮,可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。(2)特异性:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。(3)快速:仅需约1-2个小时即可完成。(4)方便:只需一步染色反应,洗涤后即可观察,不必使用二抗等进行多步操作。(5)应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。
本试剂盒足够检测20个样品。
保存条件:
-20℃保存,荧光标记液需避光保存。
注意事项:
需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS,用于封片的抗荧光淬灭封片液(P0126),用于固定的4%多聚甲醛或向我公司订购免疫染色固定液(P0098),同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向我公司订购免疫染色洗涤液(P0106)。
如果用于石蜡切片的检测,需自备蛋白酶K,二甲苯。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
EMSA探针-STAT3(10μM)折扣价关键词:EMSA探针-STAT3,YT254,10μM
ARB13329 马主要组织相容性复合体(MHC/ELA)elisa测定使用说明书 Equine major Histocompatibility complex,mhc/ela ELISA KIT
PY04-047 万古霉素 1mg/支×10支 每支添加于100ml改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(mLST)培养基中制成mLST-Vm,用于阪崎肠杆菌分子生物学检验方法选择性增菌培养
BTN80925 大提柱式植物DNAOUT Maxi Column Plant DNAOUT
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F030609 FITC标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*FITC
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59-14-3 Brdu 5-溴-2"-脱氧尿苷
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ARB13788 豚鼠白介素4(IL-4)含量分析 Guinea pig interleukin 4,IL-4 ELISA KIT
D-组氨酸 D-Phenylalanine 351-50-8
BTN70502 石蜡包埋组织DNAOUT FFPE DNAOUT
ARB12573 大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA代测服务 Rat high mobility group protein b1,hmgb-1 ELISA KIT
25322-68-3 聚乙二醇6000 PEG6000
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文献和实验的能力,如果结合了那才是真正的参与转录的转炉银子, 有的入核后却不能和DNA结合,只能等着被降解! 其实总体而言大家做试验时都希望成功,但是EMSA试验技术的独特性和复杂性决定了,要想做成功EMSA试验,拿到阳性结果可总结为一句话: 把握整体,注意细节! 我觉的EMSA的整体性包括6大点:探针制备(设计,合成,标记,纯化,退火);个人实验设计(时间剃度浓度查阅文献等);核蛋白制备;浓度测定;EMSA操作;实验时竞争设计. 这六大点都是会直接影响到EMSA试验的成功
,最长使用时间一般不宜超过3天。标记好的探针可以保存在 -20℃。3. EMSA 胶的配制:(1) 准备好倒胶的模具。可以使用常规的灌制蛋白电泳胶的模具,或其它适当的模具。最好选择可以灌制较薄胶的模具,以便于干胶等后续操作。为得到更好的结果,可以选择可灌制较大 EMSA 胶的模具。(2) 按照如下配方配制20毫升4%的聚丙烯酰胺凝胶(注意:使用29:1等不同比例的Acr/Bis对结果影响不大)。TBE buffer (10X) 1毫升重蒸水 16.2毫升39:1 acrylamide
/蛋白复合物的电泳带明显减少。 2、为什么实验背景高? 1)曝光或者成像时间过长。 2)封闭时间不足或者效率不高。 3)洗涤效果不佳。 4)实验过程中膜没有一直处于湿润状态。 3、EMSA测定需要多少量的蛋白与标记的探针? 对每一个特定的结合蛋白和探针,所用的纯化蛋白,部分纯化蛋白,粗制核抽提液需作优化:一般所用纯化蛋白的量在20-2000ng间,可将蛋白:DNA的等摩尔比调整为蛋白的摩尔数是DNA的5倍;用粗制核抽提液,需要2-10ug蛋白形成特异的复合物。 部分
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