3L聚碳酸酯锥形瓶（Fernbach Desigh），带1/

原位杂交组织化学常用试剂及处理

）4mol/L醋酸钠：取无水醋酸钠82g溶于200ml水中，用醋酸调pH至6.5，加水至250ml，高压灭菌，或0.45μm膜过滤，室温保存。 　　（11）10% SDS：10g SDS（十二烷基硫酸钠）溶于50ml水中，加水至100ml，分装后室温保存。 　　（12）20×SSC：取NaCl 175.3g;柠檬酸钠88.2g;加水至1000ml，用10mol/l NaOH调pH至7.0；高压灭菌，室温保存。 　　（13）无菌水：100ml去离子水或双蒸水，分装，高压灭菌，室温

我收集的几个Northern杂交protocol（同位素，DIG，生物素等），供大家参考！

。在RNA的提取中，常采用的蛋白质变性剂有苯酚、氯仿、十二烷基磺酸钠（SDS）等。为防止外源Rnase的污染，所有试验用品均需用DEPC处理并高压灭菌，所有试剂配制均需使用经DEPC处理过的水或灭菌处理。内源RNase的抑制采用异硫氰酸胍等强还原剂。为避免人体污染，所有试验操作均应带手套，避免人体接触所有用品。 方法二、改良Krapp提取法 试剂及其配制 RNA抽提掖： 母液：4mol 异硫氰酸胍 20mmol EDTA 20mmol MES pH 7.0 工作液：取400ml母液加入

（交流）细胞因子的检测

×SSC(共310μl),每孔加150μl。2、纤维素膜处理过程：硝酸纤维素膜（0.45μm）水中浸泡５min,再用20×SSC室温浸泡１h。3、滤器的处理及点样：用0.1N NaOH浸泡（洗）多孔过滤加样器,再用灭菌水彻底冲液。将纤维素膜压在多孔加样器的上层板的上面,再压在下层板上,赶去气泡,然后两部分夹紧,点样前,先用20×SSC（200μl）洗一遍每个孔,真空抽吸干净后,再分别点样。如有未点样孔须用150μl的20×SSC封住其孔,然后用真空泵抽吸干净,再用20×SSC清洗一次