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文献和实验型号的金属滤器(直径90 mm、100 mm、142 mm……等),配以过滤泵使用。过滤量较小的液体常用注射器推动的塑料小滤器(直径20 mm、25 mm等)。滤膜孔径有0.60 μm、0.45 μm、0.35 μm、0.22 μm、0.10μm等,以0.22 μm除菌最为保险,但对于较粘稠难滤过的液体,仍需选用孔径较大的滤膜。 ①在过滤器上装上微孔滤膜,孔径为0.22μm。 ②用布包好,湿热灭菌后使用。 2.2.2化学消毒法 常用的消毒液有如下几种
管,Eppendorf 台式离心机 10000rpm,4℃ 离心 30min。 (4)收集所得上清液即为膜组份。 Buffer A: 0.32M 蔗糖,5mM Tris-HCl(PH 7.5),120mM KCl,1mM EDTA, 1mM EGTA, 0.2mM PMSF, 1ug/ml Leupeptin, 1ug/ml Pepstatin A, 1ug/ml Aprotinin。冰上预冷。 Buffer B 20mM HEPES(PH 7.5),10% 甘油,2% Triton X-100, 1mM
min。 (4)收集所得上清液即为膜组份。 Buffer A: 0.32M 蔗糖,5mM Tris-HCl(PH 7.5),120mM KCl,1mM EDTA, 1mM EGTA, 0.2mM PMSF, 1ug/ml Leupeptin, 1ug/ml Pepstatin A, 1ug/ml Aprotinin。冰上预冷。 Buffer B 20mM HEPES(PH 7.5),10% 甘油,2% Triton X-100, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 0.2mM
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