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文献和实验,避免出现混乱,使分型结果错误。除使用微量扩增管之外,还可以使用96孔的PCR扩增板,较扩增管方便。3. 由于PCR-SSP技术对污染的DNA较为敏感,注意加样时使用带有滤膜的吸头;在吸取含有不同SSP和基因组DNA的溶液后,一定要更换吸头;用加样器吸取或混匀溶液时避免产生气泡,产生气溶胶状DNA,造成污染。4. HLA-I类基因分型时,需要较长的基因组DNA链(约250kb)作为模版,因为HLA-I类基因SSP进行互补结合的DNA序列位于第1~4外显子之间。在基因组DNA提取时应注意
一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
and Blot Station)和微孔板定位系统(96-Well Microplate Indexing Unit)。 操作过程按说明书进行,稍改动简述如下: 装针、洗针:将所配8根点样针装入玻片复印仪,使用前在清洗装置中盛入漂白剂、蒸馏水和无水乙醇,交替清洗点样针。 装片:将尼龙膜(Milipore)裁成比载玻片(W18×T36mm)略小的形状,用双面胶或胶水将两侧边缘固定在玻片上,装入手动玻片定位系统。 取样:首先将96孔板装入微孔板定位系统中,然后分别取纯化的转化和未转化植株PCR产物以及从重
独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟 Akiko Koide and Shohei Koide
基 ( 1 ) Luria-Bertani ( LB ):每升水加 10 g 菌用胰蛋白胨、5 g 酵母抽提物和 10 g 氯化钠,pH 7.0。用平板时,加 15 g/L 菌用琼脂糖。 ( 2 ) SOC:将 20 g 胰蛋白胨、5 g 酵母抽提物和 0.5 g 氯化钠溶于约 900 ml 水中;加入 10 ml 250 mmol/L 氯化钾和 5 ml 2 mol/L 氯化镁;并将最终体积调至 1 L。高压灭菌、冷却,并加入 20ml 1 mol/L 葡萄糖,用 0.2 μm 滤膜
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