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- 技术资料
- 服务名称:
多克隆抗体制备
- 提供商:
武汉金开瑞生物工程有限公司
- 规格:
详情小窗私聊
服务介绍
多克隆抗体的制备是一种通过免疫宿主动物产生多个不同的抗体克隆的技术。它基于免疫系统的特性,通过免疫宿主动物对特定抗原的免疫刺激,诱导免疫细胞产生多样性的抗体,以应对抗原的多样性和复杂性。由于多克隆抗体具有可识别多个表位、可引起凝集反应、沉淀反应等优点,被广泛应用于免疫学诊断领域,经常用作WB实验中的酶标二抗和ELISA实验中的包被抗体。
多克隆抗体存在于免疫动物的血清中,可通过直接分离血清获得。由于具有可识别多个表位、可引起凝集反应、沉淀反应等优点,被广泛应用于免疫学诊断领域,经常用作WB实验中的酶标二抗和ELISA实验中的包被抗体。
服务流程
•项目分析设计
•方案沟通
•合同签订
•项目启动
•免疫原检测
•动物免疫
•效价检测
•筛选及放大
•抗体纯化
•WB/IHC等验证
•成果交付
服务优势
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多样性:多个抗体克隆,覆盖多个抗原区域,提高抗原识别能力。
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高特异性:精确识别目标抗原,减少非特异结合。
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高亲和力:强烈结合目标抗原,增强抗原-抗体作用。
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灵活性:适用于多种应用,满足不同研究需求。
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容错性:部分抗体失效时仍有其他克隆起作用,减少失败风险。
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成本效益:相对经济实惠,一次实验可获得多个抗体克隆。
客户提供
•重组蛋白:至少2-3 mg,蛋白纯度大于90%,浓度不低于0.5 mg/mL,蛋白分子量大于10kDa;
•多肽:裸肽1 mg,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白3-4 mg,裸肽纯度大于90%,序列长度不少于10个AA;
•病毒/细菌/胶条/天然蛋白等抗原类型请具体咨询,另外也可选择由金开瑞制备抗原。
最终交付
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免疫前抗血清1 mL;免疫后抗血清12 mL/只,亲和纯化的抗体10-15 mg
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备注:若选择抗原亲和层析纯化,可提供1-5 mg纯化抗体;
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鉴定报告,包括免疫原序列、SDS-PAGE电泳图谱、表达克隆测序报告、效价检测ELISA结果,并根据客户需求,提供抗体验证结果,如WB、IHC、IP、IF等。
服务说明
| 服务编号 | 客户提供 | 抗体纯化方式 | 抗体类型 | 服务内容 | 服务周期 |
| (抗原/信息) | |||||
| JKR-pb001 | 抗原 | ProteinG/抗原亲和纯化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 | 抗原质控,动物免疫,ELISA/WB检测, 采血,ProteinG/抗原亲和纯化,WB检测 |
8-10周 |
| JKR-pb002 | 基因序列(蛋白) | ProteinG/抗原亲和纯化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 | 抗原分析及设计,全基因合成,表达质粒构建,蛋白表达及纯化,动物免疫,ELISA/WB检测,采血,ProteinG/抗原亲和纯化,WB检测 | 20-24周 |
| JKR-pb003 | 基因序列(多肽) | ProteinG/抗原亲和纯化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 | 抗原分析及设计,多肽合成,载体偶联,偶联物质控,动物免疫,ELISA/WB检测,采血,ProteinG/抗原亲和纯化 | 16-20周 |
| JKR-pb004 | 质粒模板 | ProteinG/抗原亲和纯化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 | 蛋白表达及纯化,动物免疫,ELISA/WB检测,采血,ProteinG/抗原亲和纯化,WB检测 | 16-20周 |
| JKR-pb005 | 小分子化合物 | ProteinA/G亲和纯化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 | 半抗原偶联载体,小分子偶联物质控,动物免疫, ELISA检测,采血,ProteinA/G亲和纯化 |
16-20周 |
| JKR-pb006 | 磷酸化/甲基化/乙酰化等修饰信息 | 抗原亲和纯化 | 修饰抗体 | 多肽合成(修饰/非修饰多肽),载体偶联,动物免疫, ELISA/WB检测,采血,抗原亲和纯化(修饰非修饰多肽) |
24-28周 |
案例展示
相关资源
多克隆抗体的应用及重要性
| 应用 | 描述 | 重要性 |
| 免疫组化和免疫组织化学 | 检测和定位蛋白在组织或细胞中的表达和分布 | 观察和研究蛋白的定位、表达水平和功能 |
| 免疫印迹 | 检测和定量蛋白的存在、表达水平和修饰 | 研究蛋白的功能和相互作用 |
| FC流式细胞术 | 细胞表面标记和细胞内蛋白的检测 | 细胞类型鉴定和免疫表型分析 |
| 免疫诊断 | 检测感染性疾病、肿瘤标志物和药物测定 | 临床诊断和疾病监测 |
| 药物研发 | 药物靶点发现和验证 | 治疗效果评估和新药研发 |
| 研究蛋白结构和功能 | 探索蛋白功能和相互作用 | 揭示蛋白的结构和生物学功能 |
| 免疫疗法 | 激活或抑制免疫系统的特定分子或细胞 | 癌症治疗和免疫调节 |
多克隆抗体使用注意事项
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抗体的选择与验证:选择与您的实验目的和样本类型相匹配的多克隆抗体。了解其特异性、敏感性以及与其他物种的交叉反应性。最好选择经过验证的抗体,并参考发表文献中的应用案例。
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储存条件:按照供应商的推荐储存抗体,通常需要在2-8°C或-20°C条件下避光保存。避免反复冻融,以免影响抗体的活性和稳定性。
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稀释与工作浓度:初次使用时,可能需要通过滴定实验确定最佳的工作浓度。不同的应用(如ELISA、WB、IF、IP等)可能需要不同的稀释比例。
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阻断与封闭:在进行免疫检测时,使用适当的阻断剂(如BSA、脱脂牛奶)可以减少非特异性结合。
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洗涤:实验过程中,彻底而温和的洗涤步骤对于去除非特异性结合的抗体至关重要,确保信号的特异性和清晰度。
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抗体兼容性:如果进行多重标记实验,需确保所使用的抗体间不会发生交叉反应,并且与所选的二抗兼容。
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抗原和表位多样性:由于多克隆抗体是由多个B细胞克隆产生,能识别抗原上的多个表位,这可能增强其结合能力,但也可能增加非特异性结合的风险。
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验Malaria oocysts require circumsporozoite protein to evade mosquito immunity
【实验 目的 】 ⒈ 加深对抗体基本知识的了解。 ⒉ 了解多克隆抗体的制备及纯化的基本方法。 ⒊ 了解免疫电泳的基本过程和实验依据。 一、多克隆抗体的制备 【实验 原理 】 当将抗原注射入实验动物体内时,一系列抗体生成细胞会不同程度的与抗原结合,受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体,这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。多克隆抗体
制备多克隆抗体的佐剂 如用可溶性蛋白质抗原免疫家兔或山羊,在加用佐剂时一次注入量一般为0.5~1mg/kg。如不加佐剂,则抗原剂量应加大10~20倍。佐剂有福氏(Freund’s)佐剂、脂质体佐剂、氢氧化铝佐剂、明矾佐剂以及免疫刺激复合物(immune stimulating complex,ICOM)等。 其中最常用的是福氏佐剂,根据其组成分为完全福氏佐剂(CFA)和不完全福氏佐剂(IFA)两种。IFA通常由羊毛脂1份、石腊油5份组成,每毫升IFA中
。在三次免疫后,可以获得较高效价的抗体,每次取血量可以在40ml,不要取太多,否则会造成兔子贫血。最后一次取血可以采用颈动脉放血,具体操作如下: 1、家兔仰卧于兔架上固定头部,用纱布固定四肢。头部略放低以暴露颈部。剃毛并消毒皮肤 2、沿颈部中线用手术刀切开皮肤约10cm,分离皮下结缔组织,直至暴露出气管两侧的胸锁乳突肌(小心操作,如碰到小血管出血,可用止血钳止血) 3、用直头止血钳分离胸锁乳突肌与气管间的颈三角区疏松组织,暴露出颈总动脉后用弯头眼科镊使之游离,剥离神经和结缔组织 4、于动脉
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