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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
NewPurify Plant Genomic DNA Extraction Kit
- 库存:
570
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括新型植物基因组DNA提取试剂盒报价在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:新型植物基因组DNA提取试剂盒报价
品牌:百奥莱博
编号:WE0174
规格:50次|200次
产地:国产|进口
本试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统,适合从各种不同的植物新鲜或冻存组织中提取基因组DNA,并可最大限度地去除植物组织中的杂质。本试剂盒无需使用酚/*仿抽提,操作安全。提取的基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠,适用于PCR、荧光定量PCR、分子标记、文库构建等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer LP1 | 25ml | 100ml |
| Buffer LP2 | 10ml | 40ml |
| Buffer LP3(浓缩液) | 21ml | 84ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 75ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 300μl | 1.25ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
自备试剂:无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer LP3和Buffer GW2中加入无水乙醇。使用前请检查Buffer LP1和Buffer LP2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer LP1和Buffer LP2于56℃水浴重新溶解。
操作步骤:
1、取植物新鲜组织100 mg左右或干重组织约20 mg,加入液氮充分研磨。
2、将研磨后的粉末收集到离心管(自备)中,加入400μl Buffer LP1和6μl RNase A(10 mg/ml),涡旋振荡1分钟,室温放置10分钟,使其充分裂解。
注意:
1)使用涡旋振荡或移液器吹打,充分裂解组织,组织裂解不完全会影响最终的DNA得率。
2)请勿在使用前将Buffer LP1与RNase A混合。
3、加入130μl Buffer LP2,混匀,涡旋震荡1分钟。
4、12000rpm(~~13400×g)离心5分钟,将上清移至新的离心管(自备)中。
5、加入1.5倍体积的Buffer LP3(使用前检查是否已加入无水乙醇),充分混匀(如500μl滤液加入750μl Buffer LP3)。
注意:加入Buffer LP3后应立即混匀,可能会产生沉淀但不影响后续实验。
6、将上步所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如吸附膜呈现绿色,向吸附柱中加入500μl无水乙醇,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、重复步骤7.
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱放到一个新离心管(自备)中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤10;若洗脱体积小于100μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少DNA的总产量。如果所得DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE进行洗脱。
4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
除新型植物基因组DNA提取试剂盒报价外,我公司正在打折促销以下产品:
·G250蛋白快速染色试剂
编号:WE0290
英文名称:ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
规格:250ml
该产品是以考马斯亮蓝G-250染料为基础,应用于SDS-PAGE凝胶的快速蛋白染色试剂。灵敏度高,最低可检测到20ng蛋白。染色过程简单,快速,无需孵育,染色后直接水洗,即可产生清晰背景。
注意事项:
1、若要获得最佳的脱色效果,可多次重复脱色步骤或在去离子水中脱色过夜。
2、将凝胶加入染色液后加热至沸腾,继续在脱色摇床上摇动5分钟,可增强染色效果。
3、本产品可重复使用2-3次,染色效果会随使用次数增加有所减弱。
4、本产品有轻微腐蚀性,请带手套操作。
操作步骤:
1、将电泳后的 PAGE 胶取出放入容器中,加入适量纯水(以充分覆盖PAGE 胶为宜),加热至沸腾后停止,弃去液体。
2、加入适量快速染色液(液面覆盖凝胶即可),加热至沸腾后停止,弃去染色液。
3、加入适量蒸馏水,加热至沸腾后停止,倾去蒸馏水,重复此步骤脱色至背景清晰。
实验图例
使用ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂对SDS-PAGE染色后,不同浓度蛋白染色结果
储存条件:-20℃
新型植物基因组DNA提取试剂盒报价关键词:NewPurify Plant Genomic DNA Extraction Kit,新型植物基因组DNA提取试剂盒,WE0174
·快速实时荧光定量PCR预混体系(高含量ROX校正染料)
编号:WE0143
英文名称:BaFaSYBR Mixture(High ROX)
规格:5ml
本品是专用于染料法(SYBR GreenⅠ)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列检测。本品所含荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA相结合,使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase能有效减少在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活仅需在95℃孵育20s。整个PCR反应过程比普通反应可节省约40分钟,大大缩短了PCR的反应时间。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合,有效抑制了非特异产物的产生,并显著提高PCR的扩增效率。该产品应用范围广,适用于普通和快速定量PCR程序,可适用于无需ROX校正的所有荧光定量PCR仪。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0141):
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0142):
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0143):
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
产品组成:
| 组份 | WE0141-5ml | WE0142-5ml | WE0143-5ml |
| 2×BaFaSYBR Mixture | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
| 50×Low ROX | - | 200μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 200μl |
| ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有荧光染料SYBR Green I,保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaFaSYBR Mixture | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| 50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
3)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50×Low ROX or 50×High ROX.
2、PCR反应条件:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 20 s | |
| 变性 | 95℃ | 3 s | 35-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 s | |
| 融解曲线分析 | 95℃ | 15 s | |
| 60℃ | 1 min | ||
| 95℃ | 15 s | ||
| 60℃ | 15 s |
注意:
1)本产品所采用的酶须在预变性95℃、20s条件下实现酶的活化。在此条件下,大多数模板可良好的进行解链。对GC含量高、二级结构复杂的模板,可将预变性时间延长至1分钟,以使起始模板充分解链。若高温处理时间过长,会对酶的活性造成影响。可根据模板情况确定最佳的预变性时间。
2)建议采用两步法PCR反应程序,退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定,本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
新型植物基因组DNA提取试剂盒报价关键词:NewPurify Plant Genomic DNA Extraction Kit,新型植物基因组DNA提取试剂盒,WE0174
HC0130 大张滤纸
ARB11205 人组织蛋白酶抗体(CAth Ab)尿液中含量检测 Human cathepsin antibodies,cath ab ELISA KIT
F030416 胶体金标记兔抗人IgM抗体 Rabbit Anti-Human IgM*GOLD
87-79-6 L-山梨糖 L-Sorbose
9005-64-5 Tween-20 吐温-20
ARB13600 兔子补体片断3A(C3A)免费代测 Rabbit complement fragment 3a,c3a ELISA KIT
SJ0273 Ficoll 400 聚蔗糖400
BTN130613 9°Nm DNA聚合酶 9°Nm DNA Polymerase
酒石酸铵 DL-Homocysteine thiolactone hydrochloride 3164-29-2
柠檬酸* Lithium oxalate 6080-58-6
ARB12803 小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)代做ELISA实验 Mouse β-glucuronidase,βgd ELISA KIT
321-30-2 腺嘌呤硫*(代"酸")盐 Adenine Sulfate
北京百莱博科技有限公司专业生产DNA纯化产品,欢迎来电咨询选购新型植物基因组DNA提取试剂盒报价。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP321 快捷型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头(200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 异丙醇,70%乙醇,干净吸水纸5. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机本文版权归天根生化科技(北京)有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载
以下操作按照天根产品 DP320 新型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl ,200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 无水乙醇5. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和LP3中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技(北京)有限
、 实验流程 1、 总DNA提取 使用DNA提取试剂盒提取植物基因组DNA,通过紫外分光光度计检测或用标准品跑胶检测。一般来说,100ng的基因组DNA作为反应模板是足够的。 2、 EcoR1酶消化(20ul体系/样品) 3、Mse1酶消化(20ul体系/样品) 5、 预扩增(20ul体系/样品) sample 4ul Primer
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









