特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应pGM-T 载体品牌,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
pGM-T 载体品牌
品牌:百奥莱博
规格:20次/60次
编号:YBP150
产地:国产|进口
产品介绍:
pGM-T是高效克隆PCR产物的专用载体,由克隆载体改建而成,和传统T载体EcoR V切开后加T方法不同,pGM-T通过Xcm I酶切后使其多克隆位点两侧的3"末端直接产生未配对的T碱基,因此有更高的重组效率。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR产物的3"端添加一个A,可与pGM-T 载体 3"端的T互补连接,同时3" T突出端可以防止载体的自身环化,因此可大大提高PCR产物的连接和克隆效率。pGM-T载体包含有T7和SP6 RNA聚合酶启动子,其侧端和多克隆位点区相接,多克隆位点区位于β-半乳糖苷酶的α肽编码区内。α肽插入失活使得菌落在指示培养基中呈现不同颜色,可根据颜色直接筛选重组克隆,白色克隆为阳性重组克隆,蓝色的为载体自连的克隆。
产品储存:
-20°C 保存,避免反复冻融。
除pGM-T 载体品牌外,我公司正在打折促销以下产品:
·mRNA分离纯化试剂盒(磁珠法)
编号:YBP071
规格:10次/20次
产品介绍:
大多数真核生物的mR NA 3 "末端带有Poly(A) 结构, 使用Biotin-Oligo(dT) 探针可以特异性结合结合Poly(A) 结构, 形成Biotin-Oligo(dT) -mRNA的复合物, 此复合物又可高效结合于链亲和素磁珠, 从而可以通过磁性分离把mRNA从磁珠上洗脱下来。该试剂盒即是利用此原理从总RNA中快速纯化mRNA的试剂盒。纯化的mRNA适用于所有分子生物学应用,包括体外翻译和cDNA合成。
产品特点:
• 采用世界著名公司磁珠, 该磁珠粒径均一, 对特异性探针吸附力强, 磁响应时间短, 实验可重复性好。
• 快速, 简捷, 单个样品操作一般可在40分钟内完成。
• 可以按比例扩大或缩小提取体系, 并适用于高通量、 自动化操作。
• 由于链亲和素和生物素的亲和力高, 选择性强纯化的mRNA纯度高。
适用范围:适用于从总R NA中快速分离纯化带有Poly(A)的mRNA。
产品储存:
• 磁珠储存于4°C, 不可冷冻。
• 收到试剂盒后, 应将Biotin-Oligo(dT) 取出短暂离心后-20°C储存, 避免多次冻融。
• 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化pH值变化, 各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
• 总RNA质量要好, 否则会导致产量降低。
• 磁珠用前需轻弹管底数次充分摇匀, 否则可能造成产量下降。
• 实验所需离心管、移液器枪头等必须无RNase污染。
• 实验前提前预备好65°C水浴。
• 除步骤13外, 磁珠不得离心。
• 本试剂盒可以按比例扩大或缩小提取体系, 如果起始量改变, 应按比例改变磁珠和Biotin-Oligo(dT)的使用量, 其余不变。
pGM-T 载体品牌关键词:pGM-T 载体,YBP150,百奥莱博
·Taq DNA Polymerase
编号:YBP080
规格:250U/500U/1000U/3000U
产品介绍:
Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermuaquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后,再经过三次过柱纯化分离出来的一个约94KD的重组蛋白。无外源核酸酶和细菌DNA污染,稳定性好,特异性强,适用于常规PCR扩增。
产品特点:
• 该酶具5"-3"聚合酶的活性以及5"-3"外切核酸酶活性,无3"-5"外切酶活性。
• 在7 0 - 7 5 ° C 时,D N A 聚合的延伸速度为1-2 kb/min。PCR产物3"端为A,可直接用TA载体克隆。
适用范围:
一般用于DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定和DNA平末端加A等,产物可直接用于TA克隆。
产品储存:
• -20°C 保存。浓度:5 U/μl。
·DL15000 DNA Marker
编号:YBP130
规格:50次/100次/200次
产品介绍:
本产品是由8条线状双链DNA条带组成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。
本产品为即用型产品,已含有1× Loading Buffer,可根据实验需要,直接取6 μl电泳(每1mm点样孔宽度加1.5 μl,如果加样孔较宽,可适当增加上样量)使用方便,电泳图像清晰。
本产品中8条带分别为500,1000,1500,3000,5000,7500,10000,15000 bp,其中3000 bp条带为100 ng/6 μl,其余条带浓度为50 ng/6 μl。
产品浓度:
0.09 mg/ml
产品储存:
4°C保存6个月内有效,-20°C保存一年有效。
pGM-T 载体品牌关键词:pGM-T 载体,YBP150,百奥莱博
·DL2000 DNA Marker
编号:YBP127
规格:50次/100次/200次
产品介绍:
本产品是由6条线状双链DNA条带组成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。
本产品为即用型产品,已含有1× Loading Buffer,可根据实验需要,直接取6 μl电泳(每1mm点样孔宽度加1.5 μl,如果加样孔较宽,可适当增加上样量)使用方便,电泳图像清
晰。
本产品中6条带分别为100,250,500,750,1000,2000bp,每条带浓度为50 ng/6 μl。
产品浓度:
0.05 mg/ml
产品储存:
4°C保存6个月内有效,-20°C保存一年有效。
·2× Pfu PCR Master Mix
编号:YBP090
规格:0.5ml/5ml
产品介绍:
本产品是由6条线状双链DNA条带组成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。
本产品为即用型产品,已含有1× Loading Buffer,可根据实验需要,直接取6 μl电泳(每1mm点样孔宽度加1.5 μl,如果加样孔较宽,可适当增加上样量)使用方便,电泳图像清
晰。
本产品中6条带分别为100,250,500,750,1000,2000bp,每条带浓度为50 ng/6 μl。
产品浓度:
0.05 mg/ml
产品储存:
4°C保存6个月内有效,-20°C保存一年有效。
·EASYspin植物超纯RNA快速提取试剂盒
编号:YBP001
规格:20次/50次/100次
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
适用范围:
适用于从植物组织细胞中提取无基因组DNA污染的高纯度的总RNA。
储存事项:
1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:
独特的裂解液RLTplus2迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除,基因组DNA在高离序盐条件下结合到基因组DNA清除柱上,未结合的总RNA然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内玻璃纤维膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从玻璃纤维膜上洗脱。
产品特点:
1.离心吸附柱内玻璃纤维膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在45分钟内完成。
4.独有的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
5.基因组DNA清除柱可以有效的消除基因组DNA的污染。
6.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项
1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到12,000 rpm的传统台式离心机。
2.需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器(可选),研钵。
3.裂解液RLTplus2 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.植物组织裂解是否充分直接影响到基因组DNA清除的效果和RNA 提取的质量和产量,本试剂盒中提供的裂解液RLTplus2,主要成分为异硫氰酸胍,适用于大多数植物组织的裂解,但有些植物组织(例如玉米的乳白色胚乳)或丝状真菌,由于次级代谢产物较特殊,异硫氰酸胍使样品产生固化,导致RNA 无法提取,此时可跟我们索取另一种裂解液。
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
提示:
第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量无水乙醇!
操作前在裂解液RLTplus2中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLTplus2 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLTplus2 4℃可放置一个月。
1.直接研磨法(推荐):
a.新鲜植物组织称重后取100mg迅速剪成小块放入研钵(冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg放入研钵),加入10体积(1ml)RLTplus2(请确定已加入β-巯基乙醇)和1体积(100μl) PLANTaid 室温下充分研磨成匀浆,注意应该迅速研磨让组织和裂解液RLTplus2立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
b.将裂解物转入离心管,剧烈摇晃振荡15秒,12,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid,将所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中(清除柱放入收集管中),12,000rpm离心30~60秒,收集滤液。接下步骤3
2.液氮研磨法:
a.取500μl裂解液RLTplus2(已经加入β-巯基乙醇),转入1.5ml离心管中,加入50μl PLANTaid混匀备用。
b.液氮中研磨适量植物组织成细粉后,取50mg细粉转入上述装有RLTplus2和PLANTaid的离心管, 立即用手剧烈振荡20秒,充分裂解。
在56℃温育1-3分钟有助于裂解植物,但是淀粉含量高的植物不能温育,因为提高的温度可能导致淀粉膨胀。
c.用带钝针头的一次性 1 ml(配0.9mm针头) 注射器抽打裂解物 10 次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30秒),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。
d.将裂解物12,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid, 将所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中(清除柱放入收集管中),12,000rpm离心30~60秒,收集滤液。接下步骤3
3.较精确估计所收集的滤液体积,加入0.5体积的无水乙醇,此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。将混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中,(吸附柱放入收集管中)12,000 rpm离心60秒,弃掉废液。
4.向吸附柱RA中加500μl 去蛋白液RW1,室温放置30秒,12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。
5.向吸附柱RA中加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000 rpm 离心30秒,弃掉废液。加入500μl漂洗液RW,重复一遍。
6.将吸附柱RA放回空收集管中,12,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
7.取出吸附柱RA,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water(事先在 70-90℃水浴中加热效果更好), 室温放置1分钟,12,000 rpm 离心1分钟。
8.如果预期RNA产量>30μg,加30-50μl RNase free water重复步骤7, 合并两次洗脱液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA浓度高)。
洗脱两遍的RNA洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。
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