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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 库存:
961
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
20T/50T
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒特价优惠,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒特价优惠,产品信息:
类别:分子生物学试剂
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒 | XH052 | 20T/50T |
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从聚丙烯酰胺凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛
选、连接和转化等实验。配以特制的研磨杵和过滤柱,使你的操作更方便。
操作步骤:(所有离心步骤均可使用台式离心机在室温下离心)
第一次使用前请先在15ml漂洗液中加入60ml无水乙醇。
1、将单一的目的DNA条带从聚丙烯酰胺凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入1.5ml离心管中,称取重量,用研磨杵将胶尽量挤压碎。加入2倍体积的溶胶液吹打混匀(每100mg胶加入200ul溶胶液),75℃水浴30分钟。
2、用1ml的去尖吸头吸取混合物至过滤柱中(将胶一起吸入,溶液过多时可分次加入)。13,000rpm离心1分钟。将收集管中的滤出液转入新离心管。
3、取六倍体积结合液加入原离心管(每100mg胶加入600ul),清洗管壁后加入过滤柱中(溶液过多时可分次加入),颠倒过滤柱或轻轻吹打几次混匀,13,000rpm离心1分钟。将两次收集的滤出液混合。
4、将总滤出液混匀后加入吸附柱中(溶液过多时可分次加入),13,000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。
5、向吸附柱中加入600μl漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),13,000rpm离心30-60秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。
6、向吸附柱中加入600μl漂洗液,13,000rpm离心30-60秒,倒掉废液。
7、将离心吸附柱放回收集管中,13,000rpm离心2分钟,尽量除去漂
洗液。将吸附柱开盖置于室温3-5分钟,彻底晾干,以防止残留的漂洗液影响下一步的实验。
8、将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量65–70℃预热的洗脱缓冲液(20-30μl),室温放置2分钟。13,000rpm离心2分钟收集DNA溶液。
注意:①为了增加回收效率,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,13,000rpm再次离心1分钟。
②洗脱缓冲液体积不应少于20μl,体积过小影响回收效率。
③洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。
9、DNA回收产物直接下一步实验或者-20℃保存。
注意事项:
1、电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
3、本试剂盒对<50bpDNA片段回收效率偏低(30%左右),如想回
收,应加大结合液的体积,延长吸附和洗脱的时间。
4、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越
小,回收率越低。
聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒特价优惠专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒,XH052,百奥莱博
分子生物学实验室常用的灭菌方法有哪些?
高压蒸汽灭菌、干热灭菌、化学药剂消毒、过滤除菌。
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| XH078 | 蛋白质研究 | Western blotting检测试剂盒(ECL发光) |
| XH080 | 蛋白质研究 | 10×电泳转移缓冲液 |
| XH074 | 蛋白质研究 | 载体两性电解质PH3.5-5.5 |
| XH106 | 细胞及免疫学 | SABC(山羊IgG)-FITC免疫组化试剂盒 |
| XH095 | 细胞及免疫学 | 羊抗人IgG(纯化抗体) |
| XH007 | DNA纯化 | 真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式) |
| XH043 | 其他分子生物学试剂 | BL21(DE3)受体菌 |
| XH091 | 细胞及免疫学 | HRP-羊抗小鼠IgG |
| XH090 | 细胞及免疫学 | HRP-羊抗兔IgG |
| XH093 | 细胞及免疫学 | 羊抗小鼠IgG(纯化抗体) |
| XH012 | DNA纯化 | 去内毒素质粒DNA提取试剂盒 |
| XH009 | DNA纯化 | DNA病毒基因组提取试剂盒 |
| XH100 | 细胞及免疫学 | HRP-羊抗猪IgG |
| XH010 | DNA纯化 | 动物基因组DNA提取试剂盒 |
| XH094 | 细胞及免疫学 | 羊抗兔IgG(纯化抗体) |
| XH023 | 其他分子生物学试剂 | Taq Plus DNA Polymerase |
| XH076 | 蛋白质研究 | 膜再生液 |
| XH103 | 细胞及免疫学 | 抗荧光衰减封片剂 |
| XH099 | 细胞及免疫学 | FITC-羊抗猪IgG |
| XH039 | 其他分子生物学试剂 | 氯仿:异戊醇=24:1 |
| XH055 | 蛋白质研究 | 精简型细胞裂解液 |
| XH003 | 其他分子生物学试剂 | 亲和硅烷bind-silane |
| XH029 | 其他分子生物学试剂 | pUC18 |
| XH034 | 其他分子生物学试剂 | 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料) |
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文献和实验琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化核酸和蛋白质片断的标准方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳片段的回收将在以后的文章中介绍,在这里我先介绍一下琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法,方便大家学习交流。从琼脂糖凝胶中回收DNA,是一种简单不过的常规实验操作。但是由于胶回收的质量和数量直接影响后继的一系列实验――比如酶切连接、转化筛选、测序或者PCR扩增、标记乃至显微注射等等,所以这一步的操作也显得非常重要。胶回收的质量好否直接影响后继实验的成功与否。现今除了手工回收方法外,许多公司都开发了方便的回收试剂盒
和蛋白质片断的标准方法。生物通将在后面另文讨论聚丙烯酰胺 凝胶电泳片断 回收的方法,这里首先介绍的是琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法: 1.柱回收试剂盒:可谓目前最简单快速的回收方法,只需要将电泳凝胶中的产物条带切下,用溶解Buffer彻底溶解,上包埋有纯化填料的纯化柱,离心,再洗涤一次,离心后用洗脱缓冲液洗脱。全程不过10多分钟,得到的产物溶液可以直接用于后继实验。这个方法几乎不需要什么技巧 就能得到稳定的结果,也是目前最多商品化试剂盒选择的方法。但是这个方法不适
。 二、DNA回收试剂盒(QIAquick Gel Extraction Kit Protocol) 1. 紫外灯下仔细切下含待回收DNA的凝胶,置1.5ml离心管中,称重。 2. 加入Buffer QG(每100mg凝胶加Buffer QG 300μl),置50℃水浴10min。 3. 若回收片段小于500bp或大于4kb,则需加入异丙醇(每100mg凝胶加异丙醇100μl),混匀。 4. 将小柱放在2ml收集管上,将上述溶液加于柱上。 5. 4℃离心13000g×
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