McrBC限制性内切酶折扣价

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规格：2500U|500U
品牌：百奥莱博
编号：M0272L
产地：国产|进口
特性:
测定 CpG 二核苷酸的甲基化状态
测定胞嘧啶甲基化的 DNA
概述:
McrBC 是一种核酸内切酶，无论甲基胞嘧啶*是在 DNA 的一侧链上还是在对侧链上，McrBC都能切割。对未甲基化的DNA，Mc rBC 无作用。DNA 上 McrBC 的识别位点由两个 (G/A)mC 形式的半位点组成，这两个半位点之间的距离可以达到 3 kb，但是最佳距离为 55-103 bp。McrBC 的切割需要 GTP，当存在不可水解的 GTP 类似物时，该酶可以特异地结合到甲基化 DNA 上，但不能进行切割。McrBC 作用于一对 PumCG 序列元件,以此检测高比例甲基化的 CpGs，但是不能识别内部胞嘧啶甲基化了的 HpaII/MspI 位点（CCGG）。
* 5-甲基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶或者 N4-甲基胞嘧啶。
来源:
两种组成蛋白分别纯化自含有编码 McrB和 McrC 质粒的 E.coli K-12 菌株。
反应条件:
BalbBuffer 2 + BSA + GTP，37℃ 温育。热失活:65℃ 20 分钟。
随酶提供的试剂:
10X BalbBuffer 2
100X BSA
100X GTP (100 mM)
对照质粒 DNA
单位定义:
1 单位指在 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时切割含有多个 McrBC 位点的质粒所需要的酶量。
浓度:
10,000 units/ml。
注意事项:
McrBC 在每对半位点之间切割一次，切割位点靠近某一个半位点，但是通常距最近的甲基化碱基大约 30 bp。因此，当 DNA 中存在多个 McrBC 半位点时（例如胞嘧啶甲基化基因组DNA），识别序列的可变性导致位点重叠，产生弥散状而不是细窄的条带。
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·T4 多聚核苷酸激酶（3´磷酸酶活性缺失）
编号：M0236L
规格：1KU|200U
特性:
DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化，以便进行连接反应。
DNA 或 RNA 的末端标记，用作探针和进行 DNA 测序
用 T4 多聚核苷酸激酶（M0201）除去 3´ 磷酸基团
T4 多聚核苷酸激酶（缺失 3´ 磷酸酶活性）（M0236）将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化，制备pNp 底物，用于添加到 DNA 或 RNA的 3´ 端
用 T4 多聚核苷酸激酶（缺失 3´ 磷酸酶活性）（M0236）对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记
概述:
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
来源:
重组 E. coli 菌株，克隆有 T4 多聚核苷酸激酶或修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
反应条件:
1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl（pH 7.6 @ 25℃），10 mM MgCl2，5 mM DTT]，37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
注意事项:
达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。
放射性标记反应:
50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请联系我们咨询。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（W/V）的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应:，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
一般来说，进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下，T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接，无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态，则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。
质保声明:
T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量（1）。
浓度:
10,000 units/ml。


McrBC限制性内切酶折扣价关键词：McrBC限制性内切酶,M0272L,美国

·SNAP-Cell Fluorescein
编号：S9107S
规格：50 nmol
特性:
荧光标记 SNAP-、CLIP-、ACP- 或MCP-tag 融合蛋白，用于细胞成像
标记物的荧光光谱波长范围从紫外（360 nm）至远红外（647+ nm）
有细胞通透性和非通透性两种标记物
概述:
我公司提供大量的用于标记 SNAP-、CLIP-、ACP- 和 MCP- t ag 融合蛋白的荧光底物供研究者选择。SNAP-tag 底物是由染料及通过苄基键耦联到染料上的鸟嘌呤或氯嘧啶构成；CLIP-tag 底物是由染料及通过苄基耦联至染料上的胞嘧啶构成。这些底物无需酶促反应，即可自我标记相应的tag 标签。细胞通透性底物（SNAP- 和 CLIP-Cell）不仅能标记细胞内部也能标记细胞表面，而细胞非通透性底物（SNAP- 和 CLIP-Surface）仅能特异性的标记在细胞表面表达的融合蛋白。
ACP/MCP tag 的标记基团与辅酶 A（CoA）的磷酸泛酰巯基乙胺耦联，在 ACP 或 SFP 合成酶作用下，完成标记反应。标记反应仅特异地发生在细胞表面表达的融合蛋白上。虽然 ACP- 和 MCP-tag 使用底物相同，但反应特异性却不同，区别在于需要用不同的合成酶进行标记反应

·XmaI限制性内切酶
编号：R0180L
规格：2500U|2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
Xmal是Smal的不完全同裂酶。Xmal产生5´突出端，而 Smal 产生平末端片段。为了完全切割质粒 DNA，推荐每 μg DNA 使用 0.5-1.0 单位酶量，过夜酶切(16 小时)。
甘油浓度＞5% 条件下可能出现星号活性。


McrBC限制性内切酶折扣价关键词：McrBC限制性内切酶,M0272L,美国
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