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- bersee®博尔西
- 中国
- BTR217Q-10
- 2026年01月16日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃保存
- 保质期：
1年
- 英文名：
NHS Activated Berpharose FF
- 库存：
大量
- 供应商：
北京博尔西科技有限公司
- 规格：
10ml
NHS活化琼脂糖凝胶FF（NHS activated-Berpharose FF）
1.产品介绍
NHS-琼脂糖凝胶FF是一种将琼脂糖凝胶微球用NHS活化形成的生物亲和层析分离介质。该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构，同生物活性大分子有很好的相容性，具有载量高、非特异性吸附少和流速快等特点。本活化的琼脂糖凝胶能温和地同氨基基团反应，特别适合偶联抗体、链霉亲和素、酶和核酸等功能性生物大分子。
2.规格
10ml、100ml、500ml、1L
3.产品性能
| 性能 | 指标 |
| 基质 | 6%琼脂糖微球 |
| 配体 | NHS |
| 配体密度 | 25μmol/ml |
| 载量 | ≥10mg目的蛋白/ml |
| 粒径 | 45~165μm |
| 流速/*大流速 | 50~100/700 cm/h |
| 耐反压 | 0.3MPa |
| 工作温度 | 4~40℃ |
| pH稳定范围:长时间/短时间 | 3~12/2~14 |
| 储存缓冲液 | 100%异丙纯 |
| 储存温度 | -20℃ |
| 有效期 | 1年 |
应用举例：
NHS-琼脂糖凝胶FF偶联抗体
①配制抗体：取100 mg IgG用10 ml偶联缓冲液（0.2 M NaHCO3，0.5 M NaCl，pH8.3）溶解。
②偶联反应：取10 ml NHS-琼脂糖凝胶FF，用50 ml的1 mM HCl分三次清洗去除保存液，之后立即加入到抗体偶联溶液中，4℃振荡偶联6 h或者偶联过夜。
③封闭：上述溶液过滤，用50 ml偶联缓冲液清洗偶联后的凝胶，用10 ml封闭缓冲液（0.2 M NaHCO3，0.5 M NaCl，0.5 M乙醇安，pH8.3）于室温振荡4 h（或者过夜）以封闭未偶联的基团，之后用20 ml蒸馏水清洗干净即可。
④检测：用SDS-PAGE检测偶联前后的反应液并计算偶联效率，偶联好的填料根基特性测定功能和载量。
5.注意事项：
1)偶联缓冲液可以是碳酸盐、朋酸盐和磷酸盐缓冲液，但绝对不能使用氨基缓冲体系（如Tris-HCl缓冲液）。
2)稳定的配基可以直接溶于0.2 M NaHCO3，可适当提高偶联温度（如室温）将偶联时间缩短至1~2 h。
3)如对配基的稳定性不够了解，可以选择不同pH值缓冲液和不同温度，用0.5~1 ml配基相应浓度的溶液，在无填料的条件下模拟偶联反应，观察溶液是否会产生沉淀。有沉淀产生说明偶联效果不佳，可适当降低缓冲液pH值或温度。同时可以添加约5%的甘油或PEG保护蛋白，避免产生沉淀。
4)根据偶联蛋白的稳定性选择合适的偶联pH值和温度。偶联较适pH值为pH7.5~9.0，室温或4℃均可。提高偶联温度能够提高配基的偶联效率。
5)偶联蛋白溶液的浓度以5~15 mg/ml为佳。偶联凝胶体积和配基溶液的体积比以1:0.5~1:2.0为佳。
6)如果偶联的配基不稳定，可于4℃振荡偶联1~12 h以维持配基的活性。偶联配基后应尽快清洗填料，避免配基在高pH条件下失活。
7)封闭缓冲液一般使用带氨基的小分子试剂，如乙醇安、Tris等。于pH8~9、室温条件下封闭数小时可完全封闭。推荐封闭缓冲液：0.5 M乙醇安，0.5 M NaCl，pH8.3或0.1 M Tris-HCl，pH8.5。
8)偶联中尽量使用温和的混匀方式，如振荡、翻转和旋转等，如使用磁力搅拌器或者机械搅拌，需要降低搅拌速度，使填料能够混匀完全悬浮即可，避免剧烈搅拌导致凝胶微球破碎。
9)NHS-琼脂糖凝胶FF需现取现用，避免取出后放置时间过长导致活性降低。
10)仅供科研实验使用
层析柱(预装柱)填料目录：
亲和层析填料(预装柱)
★蛋白A琼脂糖凝胶 FF (Portein A Berpharose FF)
★蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein G Berpharose FF)
★耐碱蛋白A琼脂糖凝胶 FF (rat-Portein A Berpharose FF)
★蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein AG Berpharose FF)
★镍-琼脂糖凝胶FF (Ni- Berpharose FF)
★链霉亲和素琼脂糖凝胶 FF (Streptavidin Berpharose FF)
★Strep-Tactin琼脂糖凝胶 FF (Strep-Tactin Berpharose FF) (StrepII标签蛋白纯化)
★肝素-琼脂糖凝胶 FF (Heparin- Berpharose FF)
★大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶 FF (STI- Berpharose FF)
内毒素清除琼脂糖凝胶 (Endotoxin Removal Reagent Berpharose)
GST-琼脂糖凝胶FF (GST Berpharose FF)
钴-琼脂糖凝胶FF (Co- Berpharose FF)
人血清白蛋白琼脂糖凝胶FF (HSA- Berpharose FF)
重组人源血管内皮生长因子亲和琼脂糖凝胶 FF (rh-VEGF Berpharose FF)
重组人碱性成纤维细胞生长因子亲和琼脂糖凝胶 FF (rh-bFGF Berpharose FF)
真菌毒素检测免疫亲和柱
黄曲毒素（总量：B族G族、M1、B1）- 免疫亲和柱 (AFT-IAC)
赭曲霉毒素A-免疫亲和柱 (OTA-IAC)
玉米赤霉烯酮-免疫亲和柱 (ZEA-IAC )
脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）-免疫亲和柱 (DON-IAC)
T-2毒素-免疫亲和柱 (T-2 toxin-IAC)
伏马毒素-免疫亲和柱 (FB1、FB2、FB3-IAC)
活化填料
NHS活化琼脂糖凝胶 FF (NHS Activated Berpharose FF)
环氧活化琼脂糖凝胶 FF ( Epoxy Activated Berpharose FF)
离子交换层析填料(预装柱)
DEAE-琼脂糖凝胶 FF（DEAE Berpharose FF）
Q-琼脂糖凝胶FF（Q Berpharose FF）
CM-琼脂糖凝胶FF（CM Berpharose FF）
SP-琼脂糖凝胶FF（SP Berpharose FF）
DEAE、Q、CM、SP（预装柱套装4支）
疏水层析填料(预装柱)
苯基-琼脂糖凝胶 FF（Phenyl Berpharose FF）
辛基-琼脂糖凝胶 FF（Octyl Berpharose FF）
丁基-琼脂糖凝胶 FF（Butyl Berpharose FF）
苯基、辛基、丁基（预装柱套装3支）
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- 内容
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文献和实验《Investigation of the location and secretion features of Candida albicans enolase with monoclonal antibodies》
分子在纯化时若无商品化的亲和填料可供选择，也可以利用预活化填料，按照说明书介绍的流程，自行偶联生物分子到填料上，形成独有的亲和填料，来分离纯化其对应的生物分子，如酶/底物、抗原/抗体等。如需要纯化某种单抗，可以将相应的抗原偶联到预活化填料NHS activated Sepharose 4FF或CNBr activated Sepharose 4FF上，然后通过亲和层析实验，就可以实现抗体的高纯度纯化。偶联配基时，需要考虑活化基团是否与填料匹配，以及填料本身是否带有间隔臂。如果偶联的配基是蛋白
，蛋白A 琼脂糖凝胶FF 有很好的稳定性，能耐受37 度3-5 天而对柱子的性能没有影响，是分离抗体的最佳选择。疏水色谱色谱填料苯基琼脂糖凝胶FF 以及DEAE 琼脂糖凝胶FF 也场用于抗体的分离，只是特异性不如重组蛋白A 琼脂糖凝胶FF 好。纯化IgG 抗原最有效的办法是免疫亲和，具体的方法是把抗抗原的IgG 直接偶联到环氧活化琼脂糖凝胶FF 上，然后直接高pH 吸附，低pH 洗脱就可以得到需要的抗原。对于高亲和力的抗体筛选，特别是小分子的半抗原，我们建议可以把半抗原偶联到环氧活化琼脂糖凝胶FF
和Fc段分离。同时蛋白A琼脂糖凝胶FF也可用于血清中IgG的分离，得到不含抗体的血清，蛋白A琼脂糖凝胶FF有很好的稳定性，能耐受37度3-5天而对柱子的性能没有影响，是分离抗体的最佳选择。 疏水色谱色谱填料苯基琼脂糖凝胶FF以及DEAE琼脂糖凝胶FF也场用于抗体的分离，只是特异性不如重组蛋白A琼脂糖凝胶FF好。 纯化IgG抗原最有效的办法是免疫亲和，具体的方法是把抗抗原的IgG直接偶联到环氧活化琼脂糖凝胶FF上，然后直接高pH吸附，低pH洗脱就可以得到需要的抗原。 对于高亲和力的抗体
