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微球菌核酸酶

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月15日
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    • 英文名

      Micrococcal Nuclease

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      476

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 规格

      5000U

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    规格:5000U
    编号:BTN120412
    产地:国产|进口
    英文名:Micrococcal Nuclease
    品牌:百奥莱博
    产品简介:
    Micrococcal Nuclease(微球菌核酸酶)是一种内切核酸酶,作用于单链及双链核酸,生成3′磷酸末端。对单链核酸的作用较好,能较好地分解DNA或RNA的富含AT或AU区域。本酶不需要Mg2+,其催化作用需要Ca2+的存在。 本酶主要用作:
    1. 细胞粗抽提液中核酸的水解。
    2. 为制备核小体(Nucleosome)时消化分解染色质(Chromatin)。
    纯度:
    1. 50 U的本酶和1μg的λDNA在Mg 存在下,37℃反应10分钟,DNA的电泳谱带不发生变化。
    2. SDS-PAGE: >95%。
    使用及效果:
    DNA的片段化
    1. 在微量离心管中配制下列反应液。
    DNA 100μg
    10×Buffer 5 μl
    Micrococcal Nuclease 2U
    dH2O up to 50 μl
    2. 37℃反应数分钟(通过预实验确定具体反应时间)。
    3. 加入5 μl的 200 mM EGTA(或 EDTA)停止反应。
    4. 加入5 μl(1/10量)的 3 M NaOAC(pH5.2)。
    5. 加入125 μl( 2.5倍量)的冷无水乙醇,-20℃放置30~60分钟。
    6. 离心回收沉淀,用70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
    备注:
    本酶的活性严格依赖于Ca2+的存在,用EDTA或EGTA可以终止反应。微球菌核酸酶来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ) ,是一种非特异性的核酸内切酶和核酸外切酶。该酶从重组 E. coli 菌株纯化得到,可消化双链、单链、环化以及线性的核酸。在 pH 7.0-10.0 的范围内,微球菌核酸酶均有活性,无论对于 DNA 底物还是 RNA 底物,其最适 pH 值均为 9.2。微球菌核酸酶偏向于切割富含腺苷酸、脱氧腺苷酸或胸腺苷酸的底物。酶切 DNA和RNA底物产生带有 3" 磷酸的单核苷酸和二核苷酸。
    活性单位定义:
    以热变性小牛胸腺DNA作底物,在37℃、pH8.0的条件下,30分钟生成1OD260的酸可溶性物质所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。
    Buffer成分:
    储存Buffer:Tris-HCl(pH8.0)50mM,NaCl50mM,DTT1mM,Glycerol50%。
    反应Buffer,10×:Tris-HCl(pH8.0)200mM,NaCl50mM,CaCl225mM。
    运输及保存:
    低温运输,-20℃保存,有效期一年。

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    规格:10mL
    产品简介:
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    低温运输,-20℃保存,有效期一年。

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    运输及保存:
    低温运输,4℃保存,有效期一年。避免长时间暴露于光线下,请勿冷冻。



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