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百奥莱博专业生产销售通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
规格:80次-100次|400次-500次
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:CV0501
产品介绍:
菌落PCR鉴定是T载体克隆连接后鉴定是否有阳性克隆(含插入片段)最方便快捷的方法。但是市面上能见到的菌落PCR鉴定试剂盒采用的都是T3,T7或者SP6等特异T载体引物,只能用于某种特定T载体连接阳性克隆的鉴定。如果使用不同T载体,便需同时购买多种鉴定试剂盒,大大增加了使用成本。本公司采用通用T载体引物研制的通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒,只需购买一种试剂盒,便可用于市面上所有常见的T载体(包括pGEM,pUC,pBluescript系列) 连接阳性克隆的鉴定。此外,采用T3,T7或者SP6做引物的菌落PCR鉴定试剂盒引物距离插入位点的距离非常短,因此在鉴定100bp左右或者更小片段的插入时,阴性克隆的引物二聚体条带和阳性克隆扩增条带大小接近,无法区分。往往把引物二聚体的条带看成是阳性扩增条带,造成假阳性。反之,造成假阴性。本试剂盒通用T载体引物在未插入片段时的距离至少有150bp以上,加上插入片段的长度,可以清晰的区分是插入片段扩增出的条带还是引物二聚体扩增出的条带。避免假阳性或者假阴性,大大提高了准确性。本公司研发的一管便携式PCR MasterMix预混系统,无需您一一加入各种成分,直接加入需筛选单菌落,经过1小时左右的PCR反应和电泳检测即可得到重组菌落鉴定的结果。
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通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒现货关键词:通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒,CV0501,百奥莱博
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·9°N DNA连接酶
编号:BTN130624
英文名称:9°N DNA Ligase
规格:2500U
产品简介:
9 o N DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5" -磷酸末端和 3" -羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶在 45℃-90℃ 范围内均有活性。具体有下列特点:
1.可在高温条件下,连接 DNA 链上的切刻位点
2.具有极高的耐热性,与 PCR 反应条件兼容
3.可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测
4.通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变
反应条件:
1 X 9 oN DNA连接酶反应缓冲液 [10 mM Tris-HCl,600 μM ATP,2.5 mM MgCl2,2.5 mM DTT, 0.1% Triton X -100 (pH 7.5 @ 25℃) ]。1X 9oN DNA连接酶反应缓冲液中,底物 DNA 和酶于 45℃ 温育 15 分钟,或者设定合适的反应条件使用热循环仪进行反应。连接反应通过加入含 50%甘油,50 mM EDTA 和溴酚蓝的混合物来终止。
单位定义(粘性末端活性单位)
1单位指 50 ul 反应体系中,45℃ 条件下,15 分钟能使 50% 的 1 ug BstEII消化的 λ DNA 片段(12 bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。粘性末端活性单位相当于切口封闭单位。
Buffer 成分:
10 mM Tris-HCl,50 mM KCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,200μg/ml BSA,50% Glycerol,10 mM ammonium sulfate
注意事项:
9 oN DNA连接酶不能代替 T4 DNA连接酶使用。该酶可以有效连接 12 bp 的互补片段,但却无法连接 4 bp 的互补片段(典型限制酶消化产物)。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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